Gen amplifikasyonu ve gen klonlama arasındaki temel fark, gen amplifikasyonunun bir polimeraz zincir reaksiyonu ile in vitro olarak ilgilenilen genin birçok kopyasını yapma süreci olmasıdır. Ancak gen klonlama, rekombinant bir plazmit yaparak ve onu bir konakçı bakteriye dönüştürerek, ilgili genin birçok kopyasını in vivo olarak yapma işlemidir.
Gen, bir proteini kodlayan özel bir DNA parçasıdır. Bir organizma binlerce gene sahiptir. Ayrıca, moleküler biyolojik teknikler kullanılarak önemli genlerin DNA dizilerinin çoğ altılması da mümkündür. Gen amplifikasyonu ve gen klonlama bu tür iki prosedürdür. Her iki prosedür de ilgilenilen bir genin birçok kopyasını üretir. Ancak gen amplifikasyonu ile gen klonlama arasında metodolojileri açısından bir fark vardır.
Gen Amplifikasyonu Nedir?
Gen amplifikasyonu, polimeraz zincir reaksiyonu kullanarak belirli bir genin kopyalarını oluşturma işlemidir. Bir geni amplifiye etmek için, o belirli organizmanın DNA'sı, uygun bir DNA ekstraksiyon protokolü kullanılarak ekstrakte edilmelidir. Daha sonra, ekstrakte edilen çift sarmallı DNA, ayrılmış tek sarmallar elde etmek için denatüre edilmelidir. Sonraki adım, ilgilenilen genin kopyalarını yapmak için bir PCR reaksiyonunun kullanılmasını içerir. Ayrıca, PCR karışımı gerekli primerleri, nükleotidleri, DNA polimeraz enzimini, şablon DNA'yı ve diğer bileşenleri içerir. PRC programının sonunda ilgili genin amplifikasyonu gerçekleşir.
Şekil 01: Gen Amplifikasyonu
Ayrıca, gen amplifikasyonu belirli bir dizinin saptanmasında, bir organizmanın tanımlanmasında, hastalıkların teşhisinde ve gen kütüphanelerinin oluşturulmasında, vb. bir ilk adımdır.
Gen Klonlama Nedir?
Gen klonlama, genetik mühendisliğinde gen kütüphaneleri oluşturmak veya ilgilenilen genin birçok kopyasını oluşturmak için kullanılan bir yöntemdir. Bu işlem, bir rekombinant plazmit yapılmasını ve rekombinant plazmitin bir konak hücreye, özellikle bir bakteri hücresine dönüştürülmesini içerir. Klon, orijinal organizmanın veya bir molekülün özdeş bir kopyasıdır. Gen klonlama binlerce gen klonu yapabilir.
Şekil 02: Gen Klonlama
İlgilenilen gen tanımlandıktan sonra, belirli bir kısıtlama enzimleri ile sınırlandırılarak belirli bir organizmanın genomundan ayrılabilir. Daha sonra aynı kısıtlama enzimi kullanılarak, gen fragmanını yerleştirmek için plazmitler (vektörler) açılmalıdır. Daha sonra rekombinant plazmit, elektroporasyon gibi farklı yöntemler kullanılarak bir konakçı bakteriye dönüştürülür. Rekombinant plazmitlerin bazıları, konakçı bakteri hücrelerine girer. Bir antibiyotik kullanılarak dönüştürülmüş bakteriler taze ortamda seçilebilir, izole edilebilir ve yetiştirilebilir. Böylece bu teknik, milyonlarca gen klonunun elde edilmesine yardımcı olur.
Gen Amplifikasyonu ve Gen Klonlama Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Gen amplifikasyonu ve gen klonlama iki moleküler biyolojik tekniktir.
- Bu tekniklerin her ikisinde de belirli bir DNA dizisi veya bir gen milyon veya binlerce kez çoğalır.
- Ayrıca, her iki teknik de birçok bilimsel alan için son derece önemlidir.
Gen Amplifikasyonu ve Gen Klonlama Arasındaki Fark Nedir?
Gen amplifikasyonu, PCR adı verilen in vitro yöntemi kullanarak belirli bir genin kopyalarını oluşturan bir işlemdir. Öte yandan, gen klonlama, rekombinant vektörler oluşturarak ve bunları canlı organizmada çoğ altarak in vivo yöntemi kullanarak belirli bir genin kopyalarını oluşturan bir işlemdir. Bu, gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasındaki temel farktır. Ayrıca, gen amplifikasyonu sadece birkaç saat alırken, gen klonlamanın tamamlanması birkaç gün sürer. Bu nedenle, bunu gen amplifikasyonu ile gen klonlama arasındaki bir fark olarak da düşünebiliriz. Ayrıca gen amplifikasyon işlemi daha az hata gösterirken, gen klonlama işlemi daha fazla hata gösterir.
Aşağıdaki infografik, gen amplifikasyonu ve gen klonlama arasındaki farkı özetler.
Özet – Gen Amplifikasyonu vs Gen Klonlama
Gen amplifikasyonu, in vitro koşullar altında polimeraz zincir reaksiyonu kullanılarak istenen genin kopyalarının yapılması işlemiyken, gen klonlaması, rekombinant bir DNA molekülü ve canlı bir organizma/konak kullanarak ilgili bir genin kopyalarını oluşturma işlemidir. bakteri. Dolayısıyla gen amplifikasyonu ile gen klonlama arasındaki temel fark budur.
