Anahtar Farkı – HPLC ve LCMS
HPLC ve LCMS arasındaki farkı analiz etmeden önce ilk olarak HPLC ve LCMS'nin anlamına bakalım. Kromatografi, kimyasal analizde numune bileşenlerinin kromatografik bir ortamdan geçiş sırasında ayrıldığı bir ayırma tekniğidir. Aynı zamanda numune, sabit faz ve mobil faz ile etkileşimi de içerir. HPLC, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografi anlamına gelir ve analitik kimyada sıvı kromatografi yöntemi olarak kullanılır. Sıvı Kromatografi ve Kütle Spektroskopisi (LCMS) kombinasyonu, seçilen biyomoleküllerin kantitatif analizi için geliştirilmiştir ve HPLC'ye kıyasla oldukça hassas, doğru ve spesifik bir tahlil prosedürüdür. HPLC ve LCMC arasındaki temel fark budur. Bu makale sizi kimyasal analizle ilgilenen HPLC ve LCMC ile tanıştıracak ve HPLC ile LCMS arasındaki farkları tartışacaktır.
HPLC nedir?
Yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC), analitik kimyada popüler bir ayırma tekniğidir. Esas olarak bileşenleri ayırmak, bir karışımdaki her bir bileşeni tanımlamak ve ölçmek için kullanılır. Daha önce, bu yöntem yüksek basınçlı sıvı kromatografisi olarak biliniyordu çünkü numune karışımını içeren basınçlı bir sıvı çözücünün katı bir adsorban malzeme ile doldurulmuş bir kolondan akması için pompalara bağlıydı. Numune karışımındaki her bir bileşen, katı adsorban malzeme ile farklı şekilde etkileşir, bu da farklı bileşenler için farklı akış hızları ile sonuçlanır. Bu, HPLC sütunundan dışarı akarken bileşenlerin ayrılmasına yol açabilir.
HPLC, kandaki D vitamini düzeylerinin analizi, sporcuların idrarlarındaki ilaç kalıntılarını tespit ederek yasadışı uyuşturucu kullanımı, karmaşık bir biyolojik örneğin bileşenlerinin araştırma ve analiz amacıyla ayrıştırılması gibi çeşitli uygulamalar için kullanılmıştır. ve ilaç üretimi.
LCMS nedir?
Sıvı kromatografisi–kütle spektrometrisi (LCMS), sıvı kromatografisinin fiziksel ayırma yeteneklerini kütle spektrometrisinin (MS) kütle analizi yetenekleriyle birleştiren analitik bir tekniktir. Sıvı kromatografisi bir ayırma tekniğidir ve kütle spektrometrisi, yüklü parçacıkların kütle-yük oranını analiz etmek için kullanılır. Fiziksel ayırma genellikle HPLC ve alternatif olarak HPLC-MS olarak da bilinen LCMS ile sağlanır. LCMS, HPLC'ye kıyasla çok yüksek doğruluk, duyarlılık ve özgüllüğe sahip baskın bir analitik tekniktir. Bu nedenle araştırma amaçları, ilaç analizi, gıda analizi vb. gibi birçok uygulamada faydalıdır. LCMS esas olarak karmaşık kimyasal karışımların varlığında belirli bir numunenin biyokimyasal özelliklerini ayırmak, saptamak, tanımlamak ve ölçmek için kullanılır.
HPLC ve LCMC arasındaki fark nedir?
HPLC ve LCMC'nin kıs altması ve tanımı
HPLC: HPLC, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi anlamına gelir. Esas olarak bileşenleri ayırmak, bir karışımdaki her bir bileşeni tanımlamak ve ölçmek için kullanılan bir ayırma tekniğidir.
LCMS: LCMS, Sıvı Kromatografi ve Kütle Spektrometrisi anlamına gelir. Sıvı kromatografisinin fiziksel ayırma yetenekleri ile kütle spektrometrisinin (MS) kütle analiz yeteneklerini birleştiren analitik bir tekniktir.
HPLC ve LCMC'nin Özellikleri
Sınıflandırma
HPLC: Bu yalnızca bir Sıvı Kromatografi yöntemidir.
LCMS: Bu, Sıvı Kromatografi yöntemi ile Kütle Spektrometresi yönteminin bir kombinasyonudur.
Verimlilik
HPLC: LCMS ile karşılaştırıldığında, HPLC analizi daha az verimli ve daha yavaştır.
LCMS: HPLC ile karşılaştırıldığında, LCMS analizi verimli ve daha hızlıdır.
Hassasiyet
HPLC: LCMS ile karşılaştırıldığında, HPLC analizi daha az hassastır.
LCMS: HPLC ile karşılaştırıldığında, LCMS analizi daha hassastır.
Özgünlük
HPLC: LCMS ile karşılaştırıldığında, HPLC analizi daha az spesifiktir.
LCMS: HPLC ile karşılaştırıldığında, LCMS analizi daha spesifiktir.
Doğruluk
HPLC: HPLC, bazı kimyasalların belirlenmesi için LCMS'den daha az doğru sonuçlar verir.
LCMS: LCMS, bazı kimyasalların tayini için HPLC'den daha doğru sonuçlar verir.
Bileşen
HPLC: HPLC, LCMS'nin bir bileşeni olarak düşünülebilir.
LCMS: LCMS, HPLC'nin bir bileşeni olarak kabul edilemez.
İyon Kaynağı
HPLC: HPLC cihazında iyon kaynağı yok.
LCMS: LCMS cihazında iyon kaynağı var.
Uygulamalar
HPLC: İyonlar, polimerler, organik moleküller ve biyomoleküller HPLC kullanılarak analiz edilebilir.
LCMS: Organik moleküller ve biyomoleküller analiz edilebilir. HPLC'nin aksine, LCMS tam olarak çözülmemiş karışımları incelemek için kullanılabilir.
İşlem
HPLC: Bir HPLC cihazının şeması şekil 1'de verilmiştir ve genellikle bir otomatik numune alıcı, pompalar ve bir dedektör içerir. Örnekleyici, örnek karışımını hareketli faza (su, asetonitril ve/veya metanol gibi basınçlı solvent karışımı) sokar ve bu da onu kolona aktarır. Pompalar, hareketli fazın istenen akışını ve bileşimini kolon boyunca iletir. Kolon, silika veya polimerler gibi taneli bir katı parçacık olan adsorban ile doldurulur. Dedektör, kolonda bulunan numune bileşeninin miktarıyla orantılı bir sinyal üretir, bu nedenle seçilen numune bileşenlerinin ölçülebilir analizine izin verir. HPLC cihazı kontrol edilir ve veri analizi bir dijital mikroişlemci ve kullanıcı yazılımı tarafından sağlanır.
Şekil 1: HPLC cihazının şeması
LCMS: LCMS cihazının diyagramı şekil 2'de verilmiştir. Numune özü, HPLC'den oluşan kolona eklenir. Bu sütun, fiziksel karakterlere dayalı numune metabolitlerini tutar ve farklı zaman aralıklarında kütle spektrometresine farklı metabolitler akar. Kütle spektroskopisi, parçacıkların kütlelerini değerlendirmek, bir molekülün temel düzenini belirlemek ve molekül yapılarını netleştirmek için kullanılır. Bununla birlikte, kütle-yük oranlarını belirlemek için yüklü moleküller oluşturmak için numune iyonize edilmelidir. Bu nedenle, HPLC cihazları yerine LCMS, demir kaynağı, kütle analizörü ve dedektör gibi ek üç modül içerir. Bir iyon kaynağı, gaz fazı örneğini iyonlara dönüştürebilir ve elektromanyetik alanlar kullanarak iyonları kütlelerine göre gruplandıran bir kütle analizörü. Son olarak, bir dedektör, numunede bulunan her iyonun değerlerini ölçer ve verilerini iletir. LCMS tekniği hem nitel hem de nicel uygulamalar için kullanılabilir.
Şekil 2: LCMS cihazının şeması
Sonuç olarak, HPLC bir sıvı kromatografi yöntemidir, LCMS ise sıvı kromatografi ve kütle spektrometrisinin bir kombinasyonudur. Bu analiz tekniklerinin her ikisi de farklı özelliklere sahiptir, ancak gıda bileşimlerini, farmasötikleri ve diğer biyoaktif molekülleri tanımlamak ve ölçmek için kullanılabilirler.
