Anahtar Farkı – Birincil Hücre Kültürü ve Hücre Çizgisi
Araştırma alanı, hücre kültürünün tanıtılması ve araştırma için hücre hatlarının kullanılmasıyla büyük bir dönüş yaptı. Hücrenin davranışını değerlendirmek için yapay olarak hazırlanmış hücreler ve hücre hatları üzerinde farklı testler yapılır. İnsan temelli araştırmaların çoğu, özellikle araştırma çalışmaları farmakoloji ve ilaç keşfine dayandığında, sonuçları doğrulamak için hücre kültürü ve hücre dizileri gerektirir. Birincil hücre kültürü, hücrelerin mekanik veya enzimatik yöntemlerle doğrudan izolasyonu ile hazırlanan bir kültürdür. Homolog karakterler kazanmış bir hücre çizgisi elde etmek için bir birincil hücre kültürünü sürekli olarak pasajlayarak bir hücre çizgisi hazırlanır. Birincil hücre kültürü ile hücre dizisi arasındaki temel fark, her birinin sahip olduğu geçiş sayısıdır. Birincil hücre kültürü doğrudan izole edilirken bir hücre çizgisi, bir birincil hücre kültürünü birkaç kez pasajlayarak hazırlanır.
Birincil Hücre Kültürü Nedir?
Birincil hücre kültürü, hücreleri doğrudan kaynaktan mekanik veya enzimatik yöntemlerle izole ederek bir hücre kültürü hazırlığıdır. Hücreler, tripsinizasyon veya tripsinizasyon dışı yöntemlerle izole edilir. Birincil hücre kültürleri, büyüme faktörleri, hormonlar, lipidler ve diğer tanımlanmamış bileşenleri içeren uygun büyüme ortamlarında büyütülür. Bazı ortamlara serum eşlik etmelidir. Medya, büyüme koşullarının optimize edilmesini ve hücrelerin optimum koşullarda hayatta kalmasını sağlar. Hücreler, insanlarda veya daha yüksek hayvanlarda karaciğer dokusu, endotel ve nöral doku gibi farklı doku kaynaklarından tripsinizasyon yoluyla izole edilebilir.
Hücreleri bitkilerden ve mikroorganizmalardan izole ederken, hem mekanik hem de kimyasal yöntemler kullanan özel ekstraksiyon prosedürleri kullanılır. Bu izole edilmiş hücreler, katı bir destek üzerinde hareketsiz hale getirilebilir veya bir hücre hattına geliştirilmek üzere birkaç nesil boyunca pasajlanabilir.
Birincil hücre kültürleri temel olarak iki tiptir; Yapışık hücre kültürleri ve süspansiyon hücre kültürleri. Yapışkan birincil hücre kültürleri ankraja bağımlıdır ve büyüme için sağlam bir desteğe ihtiyaç duyarlar. Yapışkan birincil hücre kültürleri esas olarak dokulardan veya organlardan türetilir. Süspansiyon birincil hücre kültürleri ankrajdan bağımsızdır ve sıvı ortamda büyürler. Süspansiyon kültürleri, büyüme fazı sırasında sürekli olarak çalkalanmalıdır. Süspansiyon birincil hücre kültürleri doğrudan kandan elde edilebilir.
Birincil hücre kültürlerinin ömrü nispeten daha kısadır, ancak in vitro koşullar altında birincil hücre kültürlerinden elde edilen bilgiler birçok çalışma için temel temeli sağlar. Hem morfolojik hem de kimyasal davranış olarak hücre özelliklerini incelemek için faydalıdırlar.
Hücre Hattı Nedir?
Hücre dizileri araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır ve şu anda kanser hücre dizileri, karaciğer hücre dizileri ve böbrek hücre dizileri gibi hücre dizileri araştırma amacıyla ticari olarak mevcuttur. Hücre çizgileri, birincil hücre kültürünün sürekli geçişi ile hazırlanır. Pasajlama, hücre kültürlerinin bir hücre hattına dönüştürüldüğü alt kültürleme sürecini ifade eder. Bu hücre çizgileri, iki boyutlu veya üç boyutlu matrislerdeki kültürlerdir ve hücre çizgileri olarak korunurlar.
Hücre çizgileri, sonlu ve sürekli hücre çizgileri olarak sınıflandırılır. Sonlu hücre hatları belirli sayıda geçişe (20 – 30 geçiş) tabi tutulur. Gerekli sayıda geçişin tamamlanmasının ardından, hücre çizgisi bir yaşlanma aşamasına girer. Büyümeleri kesin olduğu için bu hücrelerin kullanımı kolaydır. Sürekli hücre çizgileri ayrıca ölümsüzleştirilmiş hücre çizgileri olarak da adlandırılır. Bu hücre hatlarının belirli sayıda geçişi yoktur. Süresiz olarak büyürler ve böylece mutasyonlar elde edebilirler. Bu nedenle sürekli hücre dizileri, sonlu hücre dizilerinden farklı olarak kolayca mutasyona uğrarlar ve bu nedenle morfolojik ve genetik özelliklerinde değişirler.
Şekil 01: Hücre Hattı
Hücre hatları, belirli bir süre boyunca tekrar tekrar kullanılabildiği için birincil hücre kültürü kullanmaktan daha uygun olduğu için kullanılır. Ancak çoğalmaları arttıkça mutasyonlara ve kontaminasyonlara daha yatkındır.
Birincil Hücre Kültürü ve Hücre Hattı Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Hücre Kültürü ve Hücre Çizgisi türleri, bir hücrenin morfolojik, kimyasal ve genetik özelliklerini incelemek için araştırmalarda kullanılır.
- Hem Hücre Kültürü hem de Hücre Çizgisi türleri, mekanik ve enzimatik yöntemlerle ekstrakte edilir.
- Hem Hücre Kültürü hem de Hücre Hattı hücre türleri, büyüme ortamı ve özel büyüme koşulları gerektirir.
- Hem Hücre Kültürü hem de Hücre Çizgisi türleri mutasyonlara eğilimlidir.
Birincil Hücre Kültürü ile Hücre Hattı Arasındaki Fark Nedir?
Birincil Hücre Kültürü ve Hücre Çizgisi |
|
Birincil hücre kültürü, hücrelerin mekanik veya enzimatik yöntemlerle doğrudan izolasyonu ile hazırlanan bir kültürdür. | Bir hücre çizgisi, homolog karakterler kazanmış bir hücre çizgisi elde etmek için bir birincil hücre kültürünü sürekli olarak pasajlayarak hazırlanır. |
Geçiş Sayısı | |
Birincil hücre kültürleri pasajlanmaz, hücreler kültür koşulları altında korunur. | Hücreler, hücre çizgilerinin yapımında kesin veya süresiz olarak pasajlanır. |
Türler | |
Yapışkan birincil hücre kültürü ve Süspansiyon birincil hücre kültürü, iki tür birincil hücre kültürüdür. | Sonlu hücre çizgisi ve sürekli hücre çizgisi, iki tür hücre çizgisidir. |
Ömür | |
Birincil hücre kültürlerinin ömrü kısadır. | Hücre hatları daha uzun ömürlüdür. |
Özet – Hücre Çizgisine Karşı Birincil Hücre Kültürü
Birincil hücre kültürleri ve hücre dizileri, farklı koşullarda ve farklı farmakolojik yönler altında farklı hücrelerin davranış kalıplarını incelemek için araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Birincil hücre kültürleri, kaynak organ veya dokudan doğrudan izole edilir ve bir kültür ortamında büyütülür. Koşullar, belirli hücrelerin büyümesi için optimize edilmiştir. Buna karşın hücre dizileri, birincil hücre kültürlerinin sonlu veya sonsuz sayıda pasajlanmasıyla hazırlanır. Hücre hatları ticari olarak mevcuttur ve kullanım kolaylığı nedeniyle araştırmacılar arasında popülerdir.