Anahtar Fark – In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya
Kanser ve bulaşıcı hastalık teşhisi, tümörleri veya bulaşıcı hücreleri, çoğalmasını ve hücre gelişim bölgelerini tanımlamak ve bulaşıcı ve bulaşıcı hastalıkların genetik temelini analiz etmek amacıyla yeni proteomik ve genomik tabanlı tekniklerin kullanıldığı popüler bir eğilimdir. bulaşıcı Olmayan Hastalıklar. Bu, doğru ilaç işleme ve tasarlama ve hastalıklar için özelleştirilmiş tedaviler geliştirme ile sonuçlanacaktır. Yerinde hibridizasyon (ISH) ve İmmünohistokimya (IHC), kanser biyolojisinde yaygın olarak kullanılan iki tekniktir ve in situ hibridizasyon ile immünokimya arasındaki temel fark, analiz prosedüründe kullanılan moleküllerde yatmaktadır. ISH'de analizde nükleik asit probları kullanılırken, IHC'de tanısal belirlemeler için monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır.
Yerinde Hibridizasyon (ISH) nedir?
In situ hibridizasyon, dokunun bir kısmı veya bölümü üzerinde, tüm dokuda veya hücrelerde doğrudan gerçekleştirilen bir nükleik asit hibridizasyon tekniğidir. Teknik, mutasyona uğramış genleri tespit edebilen veya ilgilenilen gerekli geni tanımlayabilen DNA-DNA hibritleri veya DNA-RNA hibritleri ile sonuçlanan Watson Crick'in tamamlayıcı baz eşleşmesi teorisine bağlıdır. Tek iplikli DNA dizileri, çift iplikli DNA dizileri, tek iplikli RNA dizileri veya sentetik oligonükleotit dizileri, hibridizasyon tekniği sırasında prob olarak kullanılır ve bu problar, otoradyografi üzerine tanımlama prosedürleri için 5' ucunda bir radyoaktif fosfor ile etiketlenir veya floresan boyalar kullanılarak etiketlenir.. Kullanılan prob tipine ve takip edilen görselleştirme tekniği tipine bağlı olarak farklı tipte ISH teknikleri mevcuttur.
Şekil 01: Floresan Yerinde Hibridizasyon
Patojenlerin varlığını belirlemek ve moleküler teşhis yoluyla patojeni doğrulamak için başta bulaşıcı hastalıkların moleküler teşhisinde olmak üzere ISH'nin birçok uygulaması vardır. Ayrıca gelişim biyolojisi, karyotipleme ve filogenetik analiz ve kromozomların fiziksel haritalanması alanlarında da kullanılmaktadır.
İmmünhistokimya (IHC) nedir?
IHC tekniğinde analiz edilen ana molekül antijendir. IHC sırasında, enfeksiyon veya habis hücre proliferasyon durumu üzerine antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır. Teknik, antijen-antikor bağlanmasına dayanır ve bu teknik için enzim etiketleri kullanılır; böyle bir uygulama, ELISA'dır (Enzim bağlantılı immünosorbent tahlili). İşaretleyiciler ayrıca floresan etiketli antikorlar veya radyo etiketli antikorlar olabilir.
Şekil 02: İmmünohistokimya
IHC, kanser hücresi tespiti için yaygın olarak kullanılır. Tanı prosedürleri, tümörü tanımlamak ve karakterize etmek için tümör hücrelerinde bulunan antijenleri hedefler. Aynı prosedür, bulaşıcı ajanları teşhis etmek için dahil edilmiştir. Monoklonal ve Poliklonal antikorlar, istenen protein ile uygulanan sentetik antikor arasında antikor-antijen bağlanma reaksiyonunu sağlayarak farklı gen ürünlerini analiz etmek için de kullanılır.
In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- ISH ve IHC oldukça spesifik reaksiyonlardır.
- Her iki teknik de son derece doğrudur.
- Her iki teknik de kanser ve bulaşıcı hastalıkların teşhisinde kullanılabilir.
- Bu teknikler steril in vitro ortamlarda gerçekleştirilir.
- Her ikisi de tekrarlanabilir sonuçlar sağlayan hızlı tekniklerdir.
- ISH ve IHC, radyo etiketleme ve floresan teknikleri gibi algılama yöntemlerini kullanır.
In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark Nedir?
In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya |
|
| ISH, dokunun bir kısmı veya bölümü veya dokunun tamamı üzerinde doğrudan gerçekleştirilen bir nükleik asit hibridizasyon tekniğidir. | IHC, hücre yüzeylerine yerleştirilen özel protein belirteçleri olan antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorların kullanıldığı bir tekniktir. |
| Analiz edilen Biyo Moleküllerin Türü | |
| ISH, nükleik asitleri analiz eder. | IHC proteinleri-antijenleri analiz eder. |
| Biyokimyasal Reaksiyonun Temelleri | |
| DNA-DNA veya DNA-RNA arasındaki tamamlayıcı baz eşleşmesi bu teknikte gerçekleşir. | Antijen-antikor etkileşimleri immünohistokimyada yer alır. |
| Enzim Bağlantılı Tespit Yöntemleri | |
| Enzim bağlantılı algılama yöntemleri ISH'de kullanılamaz. | Enzim bağlantılı algılama yöntemleri IHC'de kullanılabilir. |
Özet – İn Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya
Moleküler teşhis, kanser gibi bulaşıcı olmayan bir hastalığı veya HIV veya Tüberküloz gibi bulaşıcı hastalıkları tanımlamak için kullanılabilecek, hastalığın ortaya çıkmasına neden olan hücreler üzerinde bulunan moleküler belirteçlere dayalı olarak kullanılabilen hızlı ve doğrulayıcı yöntemlerdir.. Moleküler markörler, eksprese edilmiş proteinler formunda veya bu tekniklerle ilgili yüksek bir maliyet olmasına rağmen, verimliliği artırmak ve daha az zahmetli olmak için farklı yeni tekniklerin sunulduğu genetik düzeyde mevcut olabilir. Böylece ISH, DNA-DNA veya DNA-RNA hibrit oluşumuna bağlıdır ve IHC, antikor ve antijen arasındaki spesifik reaksiyonlara bağlıdır. Bu, in situ hibridizasyon arasındaki farktır.
In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimyanın PDF Versiyonunu İndirin
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlarla kullanabilirsiniz. Lütfen PDF sürümünü buradan indirin In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark.
