Anahtar Fark – Gram Leke vs Kültür
Gram boyama, bakterileri hücre duvarlarındaki peptidoglikan tabakasının kalınlığına göre iki gruba ayırmak için gerçekleştirilen bir boyama tekniğidir. Kültür, farklı analizler için laboratuvar koşullarında mikroorganizmaların yetiştirilmesi ve muhafaza edilmesi yöntemidir. Gram boyama ve kültür arasındaki temel fark, işlevleridir; gram suşu, kültürün mikroorganizmaları büyütme ve koruma yöntemi olduğu bir bakteri boyama tekniğidir.
Gram Lekesi Nedir?
Gram boyama, Mikrobiyolojide bakteri tanımlaması için kullanılan önemli bir diferansiyel boyama tekniğidir. Bu teknik 1884 yılında Danimarkalı Bakteriyolog Hans Christian Gram tarafından tanıtıldı. Gram boyama bakterileri iki ana gruba ayırır: gram pozitif ve gram negatif; bunlar bakteriyel sınıflandırma ve tanımlamada çok önemlidir. Gram boyama, bakteri karakterizasyonu için ilk adım olarak gerçekleştirilir.
Bakteriler hücre duvarlarındaki farklılıklara göre gruplandırılır. Gram pozitif bakteriler hücre duvarlarında kalın bir peptidoglikan tabakası içerirken Gram negatif bakteriler hücre duvarlarında şekil 01'de gösterildiği gibi ince bir peptidoglikan tabakası içerir. Gram boyamanın sonucu, hücre duvarında peptidoglikan tabakasındaki kalınlık farkına bağlı olacaktır. hücre duvarı.
Şekil 1: Gram pozitif bakteriler ve Gram negatif bakteriler
Gram boyama, dört farklı reaktif kullanılarak gerçekleştirilir; birincil leke, mordan, renk giderici ajan ve karşı leke. Kristal violet ve safranin sırasıyla birincil ve karşı leke olarak görev yaparken, gram iyot ve %95 alkol sırasıyla mordan ve renk giderici olarak işlev görür.
Gram Lekesinin Temel Adımları
- Temiz bir cam slayt üzerinde bir bakteri yayması hazırlanır, ısıyla sabitlenir ve soğutulur.
- Smear, 1 – 2 dakika boyunca kristal menekşe ile doldurulur.
- Smear, fazla lekeleri çıkarmak için yavaş akan musluk suyuyla durulanır.
- Gram iyot yaymaya 1 dakika süreyle uygulanır.
- Smear yavaş akan musluk suyuyla durulanır
- Smear %95 alkol ile 2 – 5 saniye yıkanır ve yavaş akan musluk suyu ile durulanır.
- Smear 1 dakika boyunca safranin ile karşı lekelenir
- Smear yavaş akan musluk suyuyla yıkanır, kurutulur ve mikroskop altında gözlemlenir.
Gram boyamanın sonunda Şekil 02'de gösterildiği gibi gram negatif bakteriler pembe renkte, gram pozitif bakteriler ise mor renkte gözlenecektir. Gram boyamanın sonucuna kalınlık tarafından karar verilir. hücre duvarındaki peptidoglikan tabakasının Renk giderme adımı sırasında, birincil leke ve mordan, gram negatif bakterilerden kolayca çıkarılır ve ince bir peptidoglikan tabakasına sahip oldukları için renksiz hale gelir. Birincil leke, kalın bir peptidoglikan tabakasına sahip oldukları için gram pozitif bakterilerde tutulur. Birincil lekenin tutulması nedeniyle karşı boyama gram pozitif bakteriler için etkili olmayacaktır. Böylece gram pozitif bakteriler birincil leke renginde, yani mor renkte görünür olacaktır. Karşı leke, gram negatif bakterileri lekeleyecek ve safranin rengi olan çekme renginde görünecektir. Bu nedenle gram boyama ile bakterileri iki gruba ayırmak kolaydır ve bakteri farklılaşması ve tanımlanmasında değerlidir.
Şekil 2: Gram Gerilme
Kültür Nedir?
Mikrobiyal kültür, mikroorganizmaların farklı amaçlar için laboratuvar koşullarında kültürlenmesi ve muhafaza edilmesi yöntemidir. Kültürler, mikroorganizma kültürünün türüne ve amacına göre katı, yarı katı ve sıvı ortamlarda yetiştirilir. Kültürler, mikroorganizmaların ihtiyaç duyduğu gerekli besin maddeleri ve büyüme koşulları ile sağlanır. Bir kültür ortamının enerji kaynağı, karbon kaynağı, azot kaynağı, mineraller, mikro besinler, su, katılaştırıcı madde vb. gibi farklı bileşenleri vardır. Optimum sıcaklık, oksijen ve pH, yetiştirilen mikroorganizmanın türüne göre ayarlanmalıdır.
Farklı mikrobiyal kültür türleri vardır; örneğin toplu kültür, sürekli kültür, bıçaklama kültürü, agar plaka kültürü, et suyu kültürü vb. Yetiştirme ortamının bileşimine göre sentetik ortam, yarı sentetik ortam ve doğal ortam olarak bilinen farklı kültür ortamları vardır. Mikrobiyal kültürler, laminer hava akımı adı verilen özel bir oda içinde steril koşullar altında hazırlanır. Yetiştirme ortamı ve cam eşya, istenen mikroorganizmanın aşılanmasından önce sterilize edilir. Uygun steril koşullar altında, hedef mikroorganizma sterilize edilmiş besin ortamına aktarılır ve optimum sıcaklıkta inkübe edilir. Ortamın içinde, mikroorganizma sağlanan besinleri kullanarak büyüyecek ve çoğalacaktır.
Şekil 3: Plaka üzerinde bakteri kültürü
Gram Boyama ile Kültür arasındaki fark nedir?
Gram Leke vs Kültür |
|
| Grams suşu, bakteriyel farklılaşma ve tanımlama için kullanılan bir diferansiyel boyama tekniğidir. | Mikrobik kültür, laboratuvarda mikroorganizma yetiştirme yöntemidir. |
| Bileşenler | |
| Bu, iki leke dahil olmak üzere farklı reaktifler kullanır. | Bu, besinlerden ve diğer gerekli koşullardan oluşan katı, yarı katı ve sıvı ortam gibi farklı kültür ortamlarını kullanır. |
| Temel İşlevler | |
| Bu, bakterilerin iki gruba ayrılmasını sağlar: gram negatif ve gram pozitif. | Bu, mikroorganizmaların farklı amaçlar için çoğalmasına izin verir. |
| Temel | |
| Gram boyama sonucu, hücre duvarının peptidoglikan tabakasındaki farklılıklara dayanır. | Mikroorganizmalar kültür ortamında büyüyecek ve çoğalacak. |
| Sonuç | |
| Gram negatif bakteriler pembe renkte ve gram pozitif bakteriler mor renkte görünür. | Plakalarda mikroorganizma kolonileri görülebilir. Sıvı ortamda mikroorganizmalar asılı haldedir. |
Özet – Gram Leke vs Kültür
Mikrobiyal kültürler, depolama, test etme, kimyasal saflaştırma vb. gibi farklı amaçlar için laboratuvar koşullarında hazırlanır ve muhafaza edilir. Gram boyama, bakterileri gram negatif bakteriler ve gram pozitif bakteriler olarak adlandırılan iki ana gruba ayıran bir boyama işlemidir. Bu nedenle, gram boyama ile kültür arasındaki fark, gram boyamanın bakteri boyama tekniği olması, kültürün ise laboratuvarlarda mikroorganizmaları büyütme ve sürdürme yöntemi olmasıdır.
