Anahtar Fark – İmmünositokimya ve İmmünohistokimya
İmmünositokimya (ICC) ve İmmünohistokimya (IHC), moleküler teşhiste yaygın olarak kullanılan iki tekniktir ve hücreler üzerinde bulunan moleküler belirteçlere dayalı olarak hem bulaşıcı olmayan hastalıkların hem de bulaşıcı hastalıkların oluşumunu tanımlar ve doğrular. Temel fark immünositokimya ve immünohistokimya, bu tekniklerde analiz prosedürü olarak kullanılan moleküldür. ICC'de floresan gibi belirteçlerle konjuge birincil ve ikincil antikorlar kullanılırken, tanısal belirlemeler için IHC, monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır.
İmmünositokimya (ICC) nedir?
ICC, floresan belirteçler veya enzimler gibi belirteçlere bağlı birincil ve ikincil antikorları kullanır ve enfeksiyöz hücresel partiküller veya kanserli tümör hücreleri olabilen hedef hücrelerde bulunan antijenleri saptamak için güçlü bir saptama yöntemidir. İmmünositokimya için üç tip kontrol gereklidir.
- Birincil Antikor – antijene bağlanan birincil antikorun özgüllüğünü gösteren kontrol
- İkincil Antikor – etiketin birincil antikora özgü olduğunu gösteren kontrol
- Etiket Kontrolleri – etiketlemenin, endojen etiketlemenin sonucu değil, eklenen etiketin sonucu olduğunu gösterin.
Şekil 01: İmmünositokimya, hücreler içindeki tek tek proteinleri etiketler (burada, sempatik otonomik nöronların aksonlarındaki Tirozin hidroksilaz yeşil renkle gösterilmiştir).
Birincil antikor kontrolü her yeni antikora özeldir ve her deney için tekrarlanamaz. İkincil antikor kontrolü, deneyde kullanılan birincil antikora dayalı olarak tasarlanır ve her deneye dahil edilir. Etiketleme kontrolü, prosedürün bir koşulu değiştirilirse, numune değiştirilirse veya beklenmeyen etiketleme bulunduğunda dahil edilir.
ICC'nin iki ana uygulaması Radyo İmmün – Test (RIA) ve Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Testidir (ELISA). Kullanılan en yaygın antikor immünoglobulin G'dir.
İmmünhistokimya (IHC) nedir?
İmmünhistokimyada, yabancı hücrelerde antijenlerin varlığını belirlemek için kaynak numune monoklonal ve poliklonal antikorlar içerir. Bu teknik, antijen-antikor bağlanmasının spesifik reaksiyonuna dayanmaktadır. Tespitte kullanılan antikorlar, farklı işaretleyicilerle etiketlenebilir; bunlar floresan belirteçleri, radyo etiketli belirteçler veya kimyasal belirteçler olabilir. Antijen ve hedeflenen antikor arasındaki in vitro bağlanmayı kolaylaştırarak, bir hücrenin belirli bir proteininin varlığı veya yokluğu belirlenebilir.
Şekil 02: CD10 ile normal böbreğin immünohistokimyasal boyaması
Şu anda bilim adamları, malign tümör hücreleri veya HIV gibi enfeksiyöz ajanlarda bulunan antijenler olarak gelişebilen hücrelerde bulunan spesifik antijenler için hedef antikorlar geliştirmeye dahil oluyorlar.
İmmünositokimya ve İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Reaksiyonlar, ICC ve IHC'de oldukça spesifik ve doğrudur.
- ICC ve IHC uygulamaları, kanser ve bulaşıcı hastalıkların teşhisini içerir.
- Steril koşullar her iki koşulda da korunmalı ve in vitro olarak gerçekleştirilmelidir
- Her iki teknik de tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.
- İkisi de hızlıdır.
- Radyo etiketleme, floresan teknikleri hem ICC hem de IHC'de algılama yöntemleri olarak kullanılır.
- Her ikisi de antijen-antikor eşleşmesine dayanır.
İmmünositokimya ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark Nedir?
İmmünositokimya (ICC) ve İmmünohistokimya (IHC) |
|
| ICC, floresan belirteçler veya enzimler gibi birincil ve ikincil antikorlara bağlı belirteçleri kullanır ve hedef hücrelerde bulunan antijenleri saptamak için güçlü bir saptama yöntemidir. | IHC, hücre yüzeylerine yerleştirilen özel protein belirteçleri olan antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorların kullanıldığı bir yöntemdir. |
| Örnek Kaynak | |
| İnce kesitler halinde histolojik olarak işlenmiş dokulardan elde edilen örnekler ICC'de kullanılır. | IHC, tek tabakada büyütülen hücrelerden veya bir slayt üzerinde biriktirilen süspansiyondaki hücrelerden oluşan numuneleri kullanır. |
| Örnek İşleme | |
| ICC'de hücreler, hücre içi hedeflere antikor penetrasyonunu kolaylaştırmak için geçirgen olmalıdır. | IHC'de hücreler boyamadan önce formalinle sabitlenir, parafine gömülür. |
Özet – İmmünositokimya ve İmmünohistokimya
Moleküler teşhis, hücrelerde bulunan moleküler belirteçlere dayalı olarak hem bulaşıcı olmayan hastalıkların hem de bulaşıcı hastalıkların oluşumunu belirlemek ve doğrulamak için kullanılır. Moleküler belirteçler, proteinler veya DNA veya RNA dizileri olabilir; ICC ve IHC gibi teknolojilerin geliştirilmesi, bilim adamlarının hastalığı ve nedenini erken bir aşamada tanımlamasının yolunu açmıştır. Hem ICC hem de IHC, numune kaynağı olmasına rağmen antikor ve antijen arasındaki spesifik reaksiyonlara bağlıdır. İmmünositokimya ve immünohistokimya arasındaki temel fark, iki prosedürün örnek işlenmesidir.
İmmünositokimya ve İmmünohistokimyanın PDF Versiyonunu İndirin
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlarla kullanabilirsiniz. Lütfen PDF sürümünü buradan indirin İmmünositokimya ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark.
