Akış sitometrisi ile immünohistokimya arasındaki temel fark, akış sitometrisinin bir hücre veya partikül popülasyonunun fiziksel ve kimyasal özelliklerini tespit etmek ve ölçmek için lazer ışını kullanan bir teknikken, immünohistokimya monoklonal ve dokulardaki spesifik antijenleri tespit etmek için poliklonal antikorlar.
Akış sitometrisi ve immünohistokimya, hastalıkları, özellikle kanserleri teşhis etmek için kullanılan iki tekniktir. Akış sitometrisi, hücrelerin fiziksel ve kimyasal özelliklerini karakterize etmek için bir lazer ışını kullanır. İmmünohistokimya, doku kesitlerinde spesifik antijenlerin tespiti için monoklonal ve poliklonal antikorları kullanır.
Akış Sitometrisi Nedir?
Akış sitometrisi, hücre biyolojisinde popüler bir tekniktir. Bu teknik, bir hücre popülasyonunun fiziksel ve kimyasal özelliklerini tespit eder ve ölçer. Akış sitometrisi, immünoloji, moleküler biyoloji, bakteriyoloji, viroloji, kanser biyolojisi ve bulaşıcı hastalık izleme alanlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bir sıvı karışımındaki hücreleri saymak, sıralamak ve profil oluşturmak için ışık kaynağı olarak bir lazer kullanır. Bu nedenle, bir çözümdeki hücrelerin hızlı bir multi-parametrik analizini sağlar.
Şekil 01: Akış Sitometrisi
Bu teknik, bir hücre örneğinin akış sitometresine enjekte edilmesiyle başlar. Akış sitometresinin üç temel sistemi vardır: akışkanlar (bir akış hücresi), optikler (çeşitli filtreler, ışık dedektörleri ve ışık kaynağı) ve elektronikler (akış sitometresi enstrümantasyonu). Bundan önce numune, analiz edilen hücrelere bağlı olarak spesifik boyalarla işlenmelidir. Bu nedenle, floresan olarak konjuge antikorlar, DNA bağlayıcı boyalar, canlılık boyaları, iyon indikatör boyaları ve floresan ekspresyon proteinleri vb. gibi çeşitli floresan reaktifleri kullanır. Bu alet, lazer ışını boyunca bir seferde bir hücrenin akışına izin verir. Işık hücre ve bileşenleri arasında dağıldığında, farklı dalga boylarında bantlar yayar. Bu sayede on binlerce hücre hızla incelenebilir ve toplanan veriler bir bilgisayar tarafından işlenir.
İmmünohistokimya nedir?
İmmünohistokimya, ilgilenilen bir antijenin doku dağılımını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorları kullanan bir tekniktir. Histopatolojide yaygın bir tekniktir. Mikroskopi tabanlı, immün boyama tekniğidir. Bu teknik, flüoresan etiketli antikorlarla spesifik bağlanmaya dayalı olarak bir doku hücrelerinde antijenlerin seçici olarak tanımlanmasını ve lokalizasyonunu kolaylaştırır. Spesifik tümör antijenleri, belirli kanserlerde de novo eksprese edildiğinden veya yukarı regüle edildiğinden, bu teknik, kanserlerin teşhisi için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu teknik, iki önemli tümörde, yani meme ve prostat karsinomasında terapötik yanıtı tahmin etmede çok faydalıdır. Hastalık teşhisine ek olarak, ilaç geliştirme ve biyolojik araştırma alanlarında immünohistokimya kullanılmaktadır. Ayrıca, immünohistokimya, dokulardaki enfeksiyöz ajanları tespit ederken ve doğrularken faydalıdır.
Şekil 02: İmmünohistokimya
Bu teknik biyopsi gerektirir ve bunlar bir mikrotom ile kesitler halinde işlenir ve ardından kesitler uygun bir antikor ile inkübe edilir. Antijen-antikorların bağlanma bölgeleri, ışık veya floresan mikroskobu altında görselleştirilir.
Akış Sitometrisi ve İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Akış sitometrisi ve immünohistokimya, floresanla etiketlenmiş antikorları kullanan iki tekniktir.
- Her iki teknik de hücre yüzeyindeki veya hücrelerin içindeki antijenleri tespit edebilir.
- Dolayısıyla, her iki teknik de hastalıkların, özellikle bulaşıcı hastalıkların ve kanserin tespit edilmesini sağlar.
Akış Sitometrisi ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark Nedir?
Akış sitometrisi, bir hücre popülasyonunun fiziksel ve kimyasal özelliklerini saptayan ve ölçen lazer tabanlı bir tekniktir. İmmünohistokimya, bir doku hücrelerinde antijenlerin seçici olarak tanımlanmasına ve lokalizasyonuna izin veren mikroskopi tabanlı bir tekniktir. Bu, akış sitometrisi ile immünohistokimya arasındaki temel farktır. Ayrıca, akış sitometrisi bir lazer ışını kullanırken immünohistokimya antikorlara ihtiyaç duyar. Akış sitometresi, akış sitometrisinde gerekli olan ana araçtır, immünohistokimya ise bir ışık veya floresan mikroskobu gerektirir.
Aşağıda, akış sitometrisi ile immünohistokimya arasındaki farkın tablo şeklinde bir özeti bulunmaktadır.
Özet – Akış Sitometrisi ve İmmünohistokimya
Akış sitometrisi bir akış sitometresine ihtiyaç duyarken, immünohistokimya için sıradan veya floresan bir mikroskop gerekir. Ayrıca, akış sitometrisi bir lazer ışını kullanırken immünohistokimya monoklonal ve poliklonal antikorları kullanır. Ek olarak, immünohistokimya maliyeti, akış sitometrisine kıyasla nispeten düşüktür. Bu nedenle, akış sitometrisi ve immünohistokimya arasındaki farkın özeti budur. Her iki teknik de kanser ve bulaşıcı hastalıklar gibi hastalıkların teşhisinde faydalıdır.
