HPLC ve GC arasındaki temel fark, HPLC'nin katı sabit faz ve sıvı mobil faz kullanması, GC'nin ise sıvı sabit faz ve gaz mobil faz kullanmasıdır.
HPLC ve GC, bileşiklerin bir karışımdan ayrılması için kullanılan yöntemlerdir. HPLC, Yüksek Basınçlı Sıvı Kromatografisine atıfta bulunurken, GC basitçe Gaz Kromatografisidir. Bu nedenle, HPLC sıvı olan bileşenler için geçerlidir, ancak GC, bileşikler gaz halinde olduğunda veya ayırma işlemi sırasında buharlaşmaya maruz kalan bileşikler olduğunda faydalıdır. Bununla birlikte, her ikisi de, daha hafif olanlardan daha yavaş akan ağır moleküllerin aynı temel ilkesine sahiptir.
HPLC nedir?
HPLC, yüksek performanslı sıvı kromatografisidir. Bir tür kolon kromatografisidir. Bu teknik, numunenin çözücüyle (ayrılacak numune) yüksek basınçta bir kolona pompalanmasını içerir. Kolon, katı bir adsorban olan sabit fazı (hareket etmeyen) içerir. Numunedeki bileşenler, durağan faz ile etkileşime girmelidir.
Şekil 01: Bir HPLC Aygıtının Bileşenleri
Ancak, bu etkileşimler örnekteki farklı bileşenler için birbirinden farklıdır. Dolayısıyla kolon boyunca her bileşen için farklı akış hızlarına neden olur ve bu bileşenlerin ayrılmasına neden olur. Bileşen ve sabit faz arasındaki etkileşim ne kadar güçlü olursa, kolon boyunca elüsyon o kadar yavaş olur. Bu nedenle, daha güçlü etkileşimlere sahip parçacıklar, daha zayıf etkileşimler gösteren parçacıklardan ayrılır.
GC nedir?
GC, gaz kromatografisidir. Ayrıca kolon kromatografik bir tekniktir. Teknik, ayrışma olmadan kolayca buharlaşan karışımlardaki bileşenleri ayırmak için kullanışlıdır. Bu tekniğin iki ana kullanımı, bir numunenin saflığını belirlemek ve bir karışımdaki bileşenleri ayırmaktır. Bazı durumlarda, bileşenlerin tanımlanmasına da yardımcı olur. Bu yöntemde, hareketli faz bir taşıyıcı gazdır (hareketli faz), sabit faz ise bir sıvıdır (hareketli) veya inert bir katı destek üzerinde bir polimer malzemedir. Genellikle taşıyıcı gaz, helyum veya nitrojen gibi bir soy gazdır. Sabit faz bir cam kolonun içinde bulunur.
Şekil 02: Bir GC Aparatı
Kısaca tekniğin işleyişi şu şekildedir. Numunedeki bileşenler, sıvı sabit faz ile etkileşime girer. Bu, numunedeki bileşenler ile durağan faz arasındaki etkileşimler birbirinden farklı olduğundan, farklı bileşenler için farklı elüsyon oranlarıyla sonuçlanır. Bir bileşenin kolondan elute etmesi için geçen süreye alıkonma süresi denir. GC tekniğinin analitik faydası, her bir bileşen için tutma sürelerini karşılaştırabilmemizdir.
HPLC ve GC Arasındaki Fark Nedir?
HPLC yüksek performanslı sıvı kromatografisidir, GC ise gaz kromatografisidir. HPLC ve GC arasındaki temel fark, HPLC'nin bir katı sabit faz ve sıvı mobil faz kullanması, GC'nin ise bir sıvı sabit faz ve gaz halinde mobil faz kullanmasıdır. Ayrıca, HPLC ve GC arasındaki bir diğer fark, HPLC ve diğer kromatografik tekniklerin çoğunun sıcaklık kontrol stratejileri gerektirmemesidir, oysa GC'nin gaz halindeki hareketli fazı olduğu gibi tutmak için kolonunun bir fırının içine yerleştirilmesi gerekir. Bunun dışında, uygulamalarına göre HPLC ve GC arasındaki farkı belirtebiliriz. HPLC, sıvıların ayrılması için yararlı bir teknikken, GC, gazlı karışımlardaki bileşenleri ayırmada faydalıdır.
Özet – HPLC ve GC karşılaştırması
Hem HPLC hem de GC, bir karışımdaki farklı bileşenleri ayırmada yararlı olan kromatografik tekniklerdir. HPLC ve GC arasındaki temel fark, HPLC'nin katı sabit faz ve sıvı mobil faz kullanması, GC'nin ise sıvı sabit faz ve gaz mobil faz kullanmasıdır.