Anahtar Fark – İnokülasyon ve Kuluçka
Mikroorganizmalar, karakterizasyon, farklılaştırma, tanımlama, antibiyotiklerin geliştirilmesi, aşıların geliştirilmesi, transgenik (GDO) bitki ve hayvanların üretimi ve organik asitlerin ekstraksiyonu gibi çeşitli amaçlar için laboratuvarlarda ve endüstrilerde kültürlenir. Yapay olarak sentezlenmiş yetiştirme ortamlarında veya doğal substratlarda büyütülürler. Bu nedenle farklı tipte steril taze ortamlar hazırlanmalı ve istenen mikroorganizmalar saf veya karışık kültürlerde kültürlenmelidir. Ortam, mikroorganizmanın büyümesi için gerekli tüm besinlerle desteklenir. Mikroorganizmanın taze ortam veya substrata sokulması eylemi, aşılama olarak bilinir. Bununla birlikte, mikroorganizmanın yeterli büyümesini sağlamak için optimum yetiştirme koşulları sağlanmalıdır. Sıcaklık, nem ve pH gibi gerekli büyüme koşullarının sağlanması ve mikroorganizmaların ortam üzerinde büyümesine izin verilmesi işlemi, inkübasyon olarak bilinir. Bu nedenle, aşılama ve kuluçka arasındaki temel fark, aşılamanın mikroorganizmaların büyüyen ortamlara veya substratlara sokulması, inkübasyon ise mikroorganizmaların sağlanan büyüme koşulları altında büyümesine izin vermesidir.
Aşı Nedir?
Aşılama, mikroorganizmaların büyümeleri için uygun bir yetiştirme ortamına sokulması işlemidir. Başka bir deyişle, aşılama, antikor üretimini uyarmak için patojenik veya antijenik bir mikroorganizmayı canlı bir organizmaya sokan süreç olarak tanımlanabilir. İnokulasyon tamamlandığında mikroorganizmalar üremeye ve görünür koloniler oluşturarak besiyerinde çoğalmaya başlar.
Mikrobiyolojide kullanılan farklı türde aşılama araçları ve teknikleri vardır. Aşılama halkası, aşı iğnesi, pamuklu çubuklar, forseps, cam kaplayıcılar, dağıtıcı pipetler laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılan aşılama araçlarıdır. Tüm bu malzemeler kirleticilerden arındırılmış olmalıdır. Bu nedenle, kültür ortamında kontaminasyonları veya istenmeyen mikroorganizmaların büyümesini önlemek için aşılamadan önce uygun bir sterilizasyon tekniği kullanılarak sterilize edilmesi gerekir. Sürme plakası yöntemi, yayılma yeri yöntemi, dökme plakası yöntemi, nokta aşılama, bıçaklama kültürü, eğik kültür, mikrobiyal laboratuvarlarda bakteri ve mantar yetiştirmek için kullanılan birkaç aşılama tekniğidir.
Şekil 01: Streak plate tekniği kullanılarak bakterinin aşılanması
İnkübasyon Nedir?
Mikroorganizmaların farklı büyüme gereksinimleri vardır. Gerekli besin maddeleri, su, mineraller, büyüme faktörleri, eser elementler ve diğer büyüme koşulları sağlanmalıdır. Bir mikrobun taze bir ortama aşılanmasından sonra, mikroorganizmanın büyümesini desteklemek için yetiştirme koşulları korunmalıdır. Mikroorganizmaların bir ortamda gerekli büyüme koşullarını sağlayarak üremelerine izin verme işlemi inkübasyon olarak bilinir. İnoküle edilmiş kültür plakaları, inkübasyon için inkübatör adı verilen bir cihazın içine yerleştirilebilir. İnkübatörler, operatörün mikrop ihtiyacına göre sıcaklık, nem, gaz konsantrasyonları vb. kontrol edebileceği şekilde tasarlanmıştır.
Mikrobiyal Büyümenin Aşamaları Nelerdir?
Optimal koşullar sağlandığında, mikroorganizmalar ortamdaki mevcut besin maddelerini kullanarak büyüme, üreme ve çoğalma eğilimindedir. Mikrobiyal büyüme, bir kültür ortamında dört farklı faza sahiptir. Aşılamadan sonra gecikme fazını başlatırlar. Gecikme evresinde mikroplar hızlı bir büyüme veya çoğalma göstermezler. Yeni ortama uyum sağlamaya başlarlar ve orada sabitlenirler. Ayarlandıktan sonra, mikroorganizmanın üstel büyümesini gösteren ikinci aşama başlar. İkinci aşama, log aşaması veya üstel aşama olarak bilinir. Log fazı sırasında, mikroplar optimal büyüme hızı ve çoğalma gösterir. Üçüncü aşama, ortamdaki besinlerin ve diğer gereksinimlerin sınırlı olduğu log aşamasından sonra başlar. Durağan fazda büyüme ve ölme hızları eşitlenir ve büyüme eğrisi x eksenine paralel düz bir çizgidedir. Dördüncü aşama, ölüm hızının büyüme hızını aştığı ölüm aşamasıdır. Birkaç gün sonra mikrobiyal büyüme durur ve geride ölü bir kültür bırakır.
Şekil 02: Mikrobiyal plak inkübatörü
Aşı ile Kuluçka arasındaki fark nedir?
Aşı ve Kuluçka |
|
| Aşılama, mikroorganizmaları veya mikroorganizmaların süspansiyonunu bir kültür ortamına sokma işlemidir. | İnkübasyon, aşılanmış mikroorganizmaların gerekli yetiştirme koşulları altında büyümesine izin verme işlemidir. |
| Kullanılan Araçlar | |
| Aşı, aşı iğneleri, aşılama halkaları, pamuk takasları, pipetler vb. kullanılarak yapılabilir. | İnkübasyon bir kültür odasında, inkübatörde, kültür raflarında vb. yapılabilir. |
| Zaman | |
| Kısa sürede aşılama yapılır. | Kuluçka birkaç saatten birkaç güne kadar sürer. |
| Bakılan Koşullar | |
| Aşılama, laminer bir hava kabini içinde aseptik koşullar altında yapılır. | İnkübasyon sıcaklık, nem, oksijen konsantrasyonu, ışık vb. gibi uygun büyüme koşulları sağlanarak yapılır. |
Özet – İnokulasyon ve Kuluçka
Aşılama ve kuluçka, laboratuvarlarda mikroorganizmaların kültürlenmesinde yer alan iki ana adımdır. İnokülasyon, mikroorganizmayı uygun bir kültür ortamına veya substrata sokma eylemidir. İnoküle edilmiş ortamlar, büyümek ve çoğalmak için uygun yetiştirme koşulları ile sağlanır. Bu süreç kuluçka olarak bilinir. Bu, aşılama ve kuluçka arasındaki temel farktır. Mikrobiyal laboratuvarlarda kuluçka amaçlı özel araç ve gereçler bulunmaktadır. İnkübatör, mikroorganizmaların kontrollü sıcaklık, havalandırma, nem vb. altında üremesine izin veren bir cihazdır. Kontaminasyonları ve zaman kaybını önlemek için inokülasyon ve inkübasyon uygun aseptik koşullarda gerçekleştirilmelidir.
Inoculation vs Incubation'ın PDF Versiyonunu İndirin
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notlarına göre çevrimdışı amaçlarla kullanabilirsiniz. Lütfen PDF sürümünü buradan indirin Aşılama ve Kuluçka Arasındaki Fark.
