BCA ve Bradford testi arasındaki temel fark, BCA testinin zaman alıcı ve daha az doğru olması, buna karşın Bradford testinin hızlı ve doğru olmasıdır.
BCA ve Bradford testi, protein konsantrasyonu belirleme için iki test yöntemidir. Bu iki testin farklı test prensipleri ve doğruluklarında farklılıklar vardır.
BCA Testi Nedir?
BCA testi veya bisinkoninik asit testi, bir çözeltideki toplam protein konsantrasyonunu belirlemede faydalı olan bir biyokimyasal testtir. Bu yöntem aynı zamanda mucidi Paul K. Smith'ten sonra Smith testi olarak da adlandırılır. Bu analitik yöntem, Lowry protein testi, Bradford protein testi veya biüret reaktifi ile benzerlikler gösterir. Belirli bir numunedeki toplam protein konsantrasyonunu, numune çözeltisinin yeşilden mora giden bir renk değişimi yoluyla gözlemleyebiliriz. Bu renk değişimi protein içeriği ile orantılı olarak gerçekleşir. Daha sonra numunedeki renk yoğunluğunu ve protein içeriğini analiz etmek için kolorimetrik bir teknik kullanabiliriz.
BCA Protein Tahmin Yöntemi
BCA testinin mekanizması düşünüldüğünde, tipik BCA solüsyonu, pH'ı yaklaşık 11.25 olan oldukça alkali bir solüsyon içerir ve bu solüsyondaki bileşenler arasında bisinkoninik asit, sodyum karbonat, sodyum bikarbonat, sodyum tartrat ve bakır(II) sülfat pentahidrat. Bu tahlil esas olarak iki kimyasal reaksiyona bağlıdır: proteindeki peptit bağları ile bakır(II)'nin bakır(I)'a indirgenmesi ve iki bisinkoninik asit molekülünün bakır(I) iyonu ile şelatlanması, mor renkli bir kompleks ile sonuçlanır. 562 nm dalga boyunda ışığı emer. İlk reaksiyonda, peptit bağları tarafından indirgenen bakır(II) miktarı, numunedeki protein miktarı ile orantılıdır.
Bradford Testi Nedir?
Bradford tahlili, bir çözeltideki protein konsantrasyonunu ölçmede yararlı olan spektroskopik bir analitik yöntemdir. Bu yöntem Marion M. Bradford tarafından 1976 yılında geliştirilmiştir ve nispeten hızlı ve doğru bir yöntemdir.
Protein ve Bradford Reaktifinin Renk Reaksiyonu
Bir numunedeki protein miktarının konsantrasyonunu belirlemek için bu yöntemi kullanabiliriz. Bu test sırasında numunede meydana gelen kimyasal reaksiyon, yalnızca numunedeki proteinin amino asit bileşimine bağlıdır.
Bradford Protein Tahmin Yöntemi
Bu testin yöntemi göz önüne alındığında, Coomassie Brilliant Blue G-250 adlı boyanın absorbans kaymasına dayanan kolorimetrik bir protein testidir. Genel olarak bu boya, anyonik (mavi) form, nötr (yeşil) form ve katyonik (kırmızı) form olmak üzere üç formda bulunur. Bu nedenle, asidik koşullar altında boya rengini kırmızıdan maviye değiştirir. Bunun nedeni proteinin boya ile bağlanmasıdır. Buna karşılık boya ile bağlanacak protein yoksa renk değişikliği görülmez, çözelti kırmızı-kahverengi bir renk alır. Bu boya, Van der Waal kuvvetleri ve elektrostatik çekimler yoluyla proteinin karboksil grubu ile güçlü, kovalent olmayan bir kompleks oluşturabilir.
BCA ve Bradford Testi Arasındaki Fark Nedir?
BCA ve Bradford testi, protein konsantrasyonu belirleme için iki test yöntemidir. Bu iki testin farklı test prensipleri ve doğruluklarında farklılıklar vardır. BCA ve Bradford testi arasındaki temel fark, BCA testinin zaman alıcı ve daha az doğru olması, Bradford testinin ise hızlı ve doğru olmasıdır.
Aşağıdaki infografik, BCA ve Bradford testi arasındaki farkları tablo şeklinde özetler.
Özet – BCA vs Bradford Testi
BCA testi veya bisinkoninik asit testi, bir çözeltideki toplam protein konsantrasyonunu belirlemede faydalı olan bir biyokimyasal testtir. Bradford tahlili, bir çözeltideki protein konsantrasyonunun ölçülmesinde yararlı olan spektroskopik bir analitik yöntemdir. BCA ve Bradford testi arasındaki temel fark, BCA'nın zaman alıcı ve daha az doğru olması, buna karşın Bradford testinin hızlı ve doğru olmasıdır.
