Bradford ve lowry protein testi arasındaki temel fark, Bradford protein testinin Coomassie parlak mavi G-250 boyasının absorbans kaymasını temel alması, Lowry protein testinin ise bakır iyonlarının (Cu+) iyonlarının reaksiyonunu temel almasıdır. peptit bağlarının Folin–Cioc alteu reaktifi ile oksidasyonu ile üretilir.
Test, bir örneğin ana fonksiyonel bileşenlerini karakterize etmeye yardımcı olan analitik bir tekniktir. Bu nedenle, bir tahlil kalitatif veya kantitatif bir test olabilir. Laboratuvar tıbbı, farmakoloji, çevre biyolojisi, moleküler biyoloji, biyokimya ve immünoloji gibi birçok alan bu tür testleri rutin olarak kullanır. Bradford ve Lowry protein tahlili, bir numune çözeltisindeki protein konsantrasyonunu belirleyen iki biyokimyasal tahlildir. Her iki test de sonuç sağlamak için kolorimetrik teknikler kullanır.
Bradford Protein Testi Nedir?
Bradford protein testi, protein analizi için hızlı bir spektroskopik analitik prosedürdür. Bir çözeltideki protein konsantrasyonunu ölçerken yüksek doğruluk gösterir. Marion Bradford bu prosedürü 1976'da tanıttı. Bu tahlilde, toplam reaksiyon, ölçülen proteinlerin amino asit bileşimine dayanmaktadır. Başka bir deyişle, Bradford protein tahlili kolorimetrik bir tahlildir. Coomassie parlak mavi boyasını kullanır. Bu nedenle, bu kolorimetrik protein tahlili, boyanın absorbans kaymasına bağlıdır. Coomassie parlak mavi G-250 üç formatta mevcuttur: katyonik (kırmızı), anyonik (mavi) ve nötr (yeşil). Asidik koşullarda, boyanın kırmızı formu maviye dönüşür. Proteinin bağlanmasını doğrular. Protein yoksa, çözelti kahverengi renkte kalabilir.
Şekil 01: Bradford protein testi
Bradford protein testi, protein çözeltisinde bulunan çeşitli kimyasal bileşiklerin etkileşimlerine karşı daha az duyarlı olduğu için diğer protein testlerinden farklıdır. Bu bileşikler arasında sodyum, potasyum, glikoz ve sakaroz vb. bulunur.
Lowry Protein Testi Nedir?
Lowry protein testi, bir çözeltideki toplam protein seviyesini belirlemek için kullanılan biyokimyasal bir testtir. Oliver H. Lowry, 1940 yılında bu reaktifi geliştiren kişidir. Prosedür, çözeltideki protein konsantrasyonuyla orantılı bir renk değişikliği ile çözeltinin toplam protein konsantrasyonunu gösterir. Dolayısıyla, bu aynı zamanda bir kolorimetrik protein tahlilidir.
Peptit bağlarının oksidasyonu ile üretilen bakır iyonları (Cu+) ile Folin–Cioc alteu reaktifi arasındaki reaksiyon bu prosedürün temelidir. Ayrıca bu reaktif fosfomolibdik asit ve fosfor-tungstik asit içerir. Bununla birlikte, Lowry protein tahlilinin reaksiyon mekanizması iyi anlaşılmamıştır. Ancak Folin–Cioc alteu reaktifinin indirgenmesiyle sistein, triptofan ve tirozin kalıntılarının oksidasyonunu içerir.
Şekil 02: Lowry protein tahlili
Sistein kalıntıları, Lowry protein testinde gözlemlenen absorbansa katkıda bulunur ve reaksiyon, parlak mavi bir molekülle sonuçlanır; heteropoli molibden mavisi. Bu molekülün indirgenmesi, 660 nm'de absorbans ile ölçülür. Bu nedenle, Folin–Cioc alteu reaktifini az altan sistein ve triptofan kalıntılarının konsantrasyonu, çözeltideki proteinin toplam konsantrasyonunu çıkarır.
Bradford ve Lowry Protein Testi Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Bradford ve Lowry protein tahlilleri, bir çözeltideki protein konsantrasyonunu belirler.
- Her iki yöntem de kolorimetrik yöntemlerdir.
- Ayrıca her iki yöntemin de hassasiyeti yüksektir.
Bradford ve Lowry Protein Testi Arasındaki Fark Nedir?
Bradford ve Lowry protein testi, bir çözeltideki protein konsantrasyonunu belirleyen iki tür testtir. Bradford protein testi Coomassie parlak mavi G-250 boyasının absorbans kaymasına dayanırken Lowry protein testi, peptit bağlarının oksidasyonu ile üretilen bakır iyonlarının Folin-Cioc alteu reaktifi ile reaksiyonuna dayanır. Bu, Bradford ve Lowry protein tahlili arasındaki temel farktır. Bradford protein testinin sonuç vermesi 15 dakika alırken, Lowery protein testinin sonuç vermesi 40-60 dakika sürer. Dolayısıyla, bu Bradford ve Lowry protein tahlili arasındaki başka bir farktır. Ayrıca, Bradford protein tahlili amino asit bileşimine bağımlıyken, Lowry protein tahlili kısmen amino asit bileşimine bağlıdır. Dolayısıyla, bu aynı zamanda Bradford ve Lowry protein testi arasındaki farktır.
Aşağıdaki bilgi, Bradford ve Lowry protein testi arasındaki fark hakkında daha fazla ayrıntı sağlar.
Özet – Bradford vs Lowry Protein Testi
Test, bir numunenin ana fonksiyonel bileşenini karakterize etmek için kullanılan analitik bir tekniktir. Bradford ve Lowry protein tahlili, kolorimetrik teknikler altında işlev gören iki tip protein tahlilidir. Hem Bradford hem de Lowry protein tahlilleri, bir çözeltideki protein konsantrasyonunu belirler. Bununla birlikte, Bradford ve Lowry Protein Testi arasındaki temel fark, kullandıkları kolorimetrik teknikte yatmaktadır. Bradford protein testinde Coomassie parlak mavi G-250 kullanılırken Lowry protein testinde bakır iyonları (Cu+) iyonları ve Folin–Cioc alteu reaktifi kullanılır. Ayrıca Bradford yöntemi, Lowry protein testinden daha hızlı sonuçlar verir. Ancak her iki yöntem de son derece hassas yöntemlerdir ve çeşitli maddelerden kaynaklanan etkileşimlere tabidir.
