Anahtar Farkı – Transformantlar ve Rekombinantlar
Rekombinasyon ve transformasyon, bir organizmanın özelliklerinin genetik materyali manipüle edilerek kasıtlı olarak değiştirildiği genetik mühendisliğinde iki önemli adımdır. Rekombinasyon, yabancı DNA'nın bir vektör genomuna dahil edildiği ve rekombinant DNA molekülünün oluşturulduğu bir işlemdir. Dönüşüm, rekombinant molekülün konakçı organizmaya girdiği bir sonraki adımdır. Konakçı hücre veya organizma, rekombinant molekülün ekspresyonunu kolaylaştırır. temel fark transformantlar ve rekombinantlar arasında transformantlar, rekombinant molekülü içeri alan ve ekspresyonu kolaylaştıran hücreler veya organizmalar iken rekombinantlar, yabancı DNA'nın genomuna yerleştirilmesine ve ekspresyon için konakçı transformantlara taşınmasına izin veren vektörlerdir.
Transformant nedir?
Transformantlar, ifade için rekombinant DNA'nın alındığı hücreler veya organizmalardır. Bakteriler, üremeleri, çoğalmaları ve laboratuvar koşullarında ele alınmaları ve transformasyon işlemlerinin diğer organizmalara göre daha kolay olması nedeniyle genetik mühendisliğinde yaygın olarak konak organizma olarak kullanılmaktadır. Genetik mühendisliğinde kullanılan en popüler konak bakteri bakteri E coli'dir.
Dönüşüm süreci sırasında, konakçı hücreler rekombinantları almak için uyarılır. Bununla birlikte, bazı konakçı hücreler rekombinant molekülleri almaz. Bunlar transformantlar olarak bilinirler ve içinde rekombinant DNA molekülleri içeren hücreler transformantlar olarak bilinir. Dönüştürücü olmayanlardan dönüştürücülerin seçimi, moleküler biyolojide seçilebilir işaretler kullanılarak yapılır. Seçilebilir işaretleyiciler, DNA eki ile birlikte vektör genomuna eklenir. Yaygın olarak kullanılan seçilebilir belirteçler antibiyotiğe dirençli genlerdir. Marker genler, transformantların farklılaşmasını kolaylaştırır ve süreci devam ettirir. Dönüştürme işleminden sonra bakteri, antibiyotik içeren bir ortamda büyütülür. Sadece transformantlar, içindeki rekombinantlara sahip oldukları için bu besiyerinde büyüyebilirler.
Rekombinant DNA molekülü konakçı organizmanın içinde dönüştürüldüğünde, yabancı DNA ya konak hücre genomuna entegre edilebilir ya da sitoplazmada bütünleşmemiş halde kalabilir. Ancak yabancı DNA'nın ekspresyonu ve replikasyonu konak organizmada meydana gelir ve süreçten istenen sonucu verir.
Rekombinant nedir?
A rekombinant, yabancı DNA içeren rekombine genoma sahip bir organizma veya hücredir. Rekombinantlar, genetik mühendisliği sürecinin bir sonucudur. İlgilenilen genlerin eklenmesi ve genomun değiştirilmesiyle yapay olarak in vitro olarak oluşturulurlar. Genellikle bakteriyel plazmitler ve bakteriyofajlar, genetik mühendisliğinde rekombinant olarak işlev görür. Farklı DNA'lardan oluşan kimeraya sahiptir. Rekombinant DNA molekülü, yabancı DNA'yı konak organizmaya taşır ve eksprese etmesini ve istenen ürünü oluşturmasını sağlar.
Rekombinant moleküller, kısıtlama endonükleazları ve DNA ligazları kullanılarak oluşturulur. İstenen DNA parçası, orijinal organizmadan ayrılır ve dönüşüm için rekombinantı yapmak üzere vektöre eklenir. İlgilenilen genin kesilmesi ve vektör organizmasının açılması, onları birleştirmek için uyumlu yapışkan uçlar oluşturmak için aynı kısıtlama enzimi kullanılarak yapılmalıdır. Yabancı DNA, vektör genomuna dahil edildiğinde, rekombinant veya rekombinant DNA molekülü olarak bilinir.
Şekil 02: Rekombinant DNA
Transformantlar ve Rekombinantlar arasındaki fark nedir?
Transformantlar ve Rekombinantlar |
|
| Transformantlar, içinde rekombinant DNA molekülü bulunan hücrelerdir. | Rekombinantlar, yabancı DNA'nın kendi genomuna eklendiği taşıyıcı moleküllerdir. |
| Yabancı DNA'nın İfadesi | |
| Rekombinant DNA'yı ifade edebilen konak hücrelerdir. | Konakçı organizma içinde kendi kendini kopyalayabilmelidirler. |
| Seçim | |
| Kolaylıkla büyüyüp çoğalabilen hücreler konak hücre olarak seçilir. | Kolayca çıkarılabilir olmalı ve seçilebilir işaretler içermelidir. |
Özet – Transformantlar ve Rekombinantlar
Transformantlar, içinde rekombinant DNA molekülleri bulunan hücreler veya organizmalardır. Rekombinantlar, genetik rekombinasyon geçirmiş ve genomlarında yabancı DNA'ya sahip organizmalar veya hücrelerdir. Bakteriyel hücreler genellikle transformasyon için konakçı hücreler olarak kullanılır ve plazmitler ve bakteriyofajlar, rekombinant DNA teknolojisinde vektörler olarak sıklıkla kullanılır. Bu, transformantlar ve rekombinantlar arasındaki farktır.
