Dökme plakası ve Yayma plakası arasındaki temel fark, yayma plakasında agar ortamının yüzeyine bilinen bir numune hacminin yayılması, dökme plakasında ise bilinen bir hacimdeki numune ile karıştırılmasıdır. agar ve daha sonra bir tabağa döküldü. Bu iki tekniğin doğruluğu karşılaştırıldığında, dökme plakası, yayma plakasından daha yüksek bir doğruluğa sahiptir.
Standart plaka sayımı yöntemi, bir numune içindeki canlı (büyüyen/yetiştirilebilir/canlı) mikroorganizmaların sayısını sayan, büyümeye dayalı bir yaklaşımdır. Canlı mikroorganizma sayısını analiz etmek için birçok mikrobiyolojik alanda kullanımda olan güçlü bir yöntemdir. Gıda ve mandıra, tıp, çevre, su ve tarım, mikrobiyal genetik, moleküler mikrobiyoloji, büyüme ortamı geliştirme ve Biyoteknoloji (biyoreaktör teknolojisi, fermantasyon, atık/atık su arıtma vb.) gibi alanlar bu tekniği kullanır. Ayrıca, standart bir plaka sayımı gerçekleştirmenin iki ana yolu vardır: bunlar, Yayma plaka tekniği ve Dökme plaka tekniğidir.
Dökme Plakası Nedir?
Pour plate tekniği, bir numunede bulunan bazı canlı hücreleri saymak için kullanılan mikrobiyal bir yöntemdir. Dökme plaka yönteminin özelliği, bilinen bir hacimdeki numunenin önce agar ile karıştırılması ve ardından plakaya dökülmesidir.
Şekil 01: Dökme Tabağı
Diğer adımlar, bir sonraki bölümde ele alınan yayma plakası tekniğine benzer. Örnekle karıştırılmış agarın dökülmesinden sonraki adım, katılaşmasına ve inkübe edilmesine izin vermektir. İnkübasyondan sonra, 1 g veya 1 ml için nihai CFU'yu hesaplamak için canlı kolonilerin sayısını saymak esastır.
Yayma Plakası Nedir?
Spread plate, bir numunedeki canlı hücreleri saymak için kullanılan bir tekniktir. Bu teknik için, numunenin en az birinin sayılabilir sayıda koloniye yol açmasını sağlamak için seri bir seyreltme gereklidir. Buradaki işlem, bir agar plakasının yüzeyine belirli bir hacimde seyreltme pipetlemek ve alkolle alevlenmiş ve soğutulmuş bir cam yayıcı ile agar yüzeyine hızlı ve eşit bir şekilde yaymaktır. Güvenilir bir ortalama değer elde etmek için tekrarların gerçekleştirilmesi gereklidir. Bir sonraki adım, bu plakaları kısa bir süre kurutmak ve ardından ters çevirerek büyüme ve belirli bir inkübasyon süresi için uygun sıcaklıktaki bir inkübatöre yerleştirmek.
Şekil 02: Yayma Plakası
İnkübasyondan sonra plakları incelemek büyümeyi gösterecektir. Bir veya daha fazla seyreltmede, aşılayıcılarda bulunan hücre sayısı (örn. 100 veya 200μl), agar yüzeyinde 30 ila 300 ayrı koloniye yol açacaktır. 30'dan az koloni sayımı istatistiksel olarak güvenilmezdir. 300'ün üzerindeki sayıları saymak zordur ve hataya açıktır.
Dökme Plakası ve Yayma Plakası Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Yayma plakası ve dökme plakası, bir numunede bulunan canlı hücre sayısını elde etmek için kullanılan iki tekniktir.
- Her ikisi de düz ileri yöntemlerdir.
- Örnekleme hataları her iki yöntemde de olabilir.
- Büyüme koşullarının sınırlamaları her iki yöntemin de sonucunu etkiler.
- Teknik hatalar da her iki yöntemin de nihai sonucunu etkileyebilir.
- Yaşanabilir olsa da, iki yöntem kültürlenemeyen bakterileri büyütmek için kullanılmamaktadır.
Dökme Plakası ile Yayma Plakası Arasındaki Fark Nedir?
Pour plate, bir numunedeki birkaç canlı hücreyi numaralandırmak için kullanılan mikrobiyal bir tekniktir. Yayılmış plaka tekniği, ortamın yüzeyinde büyüyen bakterileri saymak için başka bir tekniktir. Dökme plaka tekniğinde işlem, numuneyi dökme plaka üzerindeki katılaşmış ortam yüzeyine eklemektir. Ancak, spred plaka tekniğinde işlem, örneğin erimiş agar ile karıştırılması ve ardından plakaya dökülmesidir.
Bu iki tekniğin doğruluğu ile ilgili olarak, dökme plakası, yayma plakasından daha yüksek bir doğruluğa sahiptir. Ayrıca, dökme plakadan farklı olarak, numuneyi bir yayma plakası üzerinde yüzeye eşit olarak yaymak için bir cam yayıcı kullanılır. Ayrıca, dökme plakası kullanarak aerobları, anaerobları ve fakültatif anaerobları saymak mümkündür. Ancak yayma plakası kullanılarak sadece aerobları saymak mümkündür. Ayrıca, dökme yöntemi için sıvı erimiş agar ortamı gerekliyken, yayma plakası gerçekleştirmek için katılaştırılmış agar plakaları gereklidir.
Özet – Dökme Plakası ve Yayma Plakası
Dökme plakası ve Yayma plakası, bir numunedeki mikrobiyal hücrelerin sayımını kolaylaştırmak için mikrobiyolojide iki tekniktir. Her iki yöntem de büyümeye dayalıdır, dolayısıyla canlı hücreleri ölçün. Dökme plakası sırasında, numunenin bilinen bir hacmi erimiş agar ile karıştırılır ve plakaya dökülür. Yayma plakası sırasında, katılaştırılmış agar ortamının yüzeyine bilinen bir hacim yayılır. Bu, dökme plakası ve yayma plakası arasındaki farktır.