HEK293 ve HEK293t arasındaki temel fark, HEK293'ün kırpılmış insan adenovirüs tip 5DNA ile transfekte edilmiş embriyonik insan böbreğinden türetilen ölümsüzleştirilmiş bir hücre çizgisi olması, HEK293t'nin ise HEK293 orijinal hücre çizgisinden türetilen bir yavru hücre çizgisi olmasıdır. SV40 replikasyon orijinini taşıyan bir plazmit vektörü ile transfekte edilmiştir.
Transfeksiyon, genellikle genotip ve fenotiplerini etkilemek için yabancı DNA ve RNA'nın hücrelere verilmesi işlemi olarak tanımlanır. Çeşitli biyolojik, kimyasal ve fiziksel yöntemlerle yabancı nükleik asitlerin bu tür girişleri hücrenin özelliklerini değiştirebilir. Nihayetinde bu, hücre bağlamında gen fonksiyonu ve protein ekspresyonunun çalışmasına izin verir. HEK293 ve HEK293t, transfeksiyon eğilimleri nedeniyle hücre biyolojisi araştırmalarında uzun yıllardır yaygın olarak kullanılan iki hücre dizisidir.
HEK293 nedir?
HEK293, birçok rekombinant protein üretmek için kesilmiş insan adenovirüs tip 5DNA ile transfekte edilen embriyonik insan böbreğinden türetilen ölümsüzleştirilmiş bir hücre dizisidir. HEK293'ler ilk olarak 1973'te Hollandalı biyolog Alex Van der Eb tarafından insan böbrek hücrelerinden izole edildi. Bu hücreler bir dişi fetüsün doku kültüründe büyütüldü. Daha sonra, Van der Eb'in laboratuvarında doktora sonrası araştırmacı olan Frank Graham tarafından makaslanmış insan adenovirüs tip 5DNA ile transfekte edildiler. Bu hücre dizisi, Frank'in 293rd deneyi olduğu için HEK293 olarak adlandırıldı.
Şekil 01: HEK293
Adenoviral genlerin HEK hücre genomuna dahil edilmesi, bu hücrelerin yüksek miktarda rekombinant proteinleri çok verimli bir şekilde üretmesini sağlar. Ayrıca, adenoviral vektör, CMV promotör bölgesini içerir; dolayısıyla bu verimliliği daha da artırır. Bu hücre çizgisi, gen ekspresyonu çalışmaları için bir konakçı olarak kullanılmıştır. Bu hücre dizisi aynı zamanda biyoteknoloji endüstrisi tarafından gen terapisi için terapötik proteinler üretmek için kullanılır.
HEK293t nedir?
HEK293t, yüksek miktarda rekombinant protein üretmek için SV40 replikasyon orijinli bir plazmit vektörü ile transfekte edilmiş HEK293 orijinal hücre çizgisinden türetilen bir yavru hücre çizgisidir. HEK293t, SV40 büyük T antijeninin mutant bir versiyonunu ifade eden bir insan hücre dizisidir. HEK293t, Michele Carlos'un Stanford'daki laboratuvarında, HEK29E hücre hattının, SV40 büyük T antijeninin sıcaklığa duyarlı bir mutantını kodlayan bir plazmit ile stabil transfeksiyonu yoluyla oluşturuldu. Başlangıçta 293/tsA1609neo olarak adlandırılıyordu. Bunun nedeni, transfeksiyonun neomisin direnci ve SV40 büyük T antijeninin tsA 1609 alelinin ifadesini veren bir hücre çizgisi oluşturmak için kullanılmasıdır.
Şekil 02: HEK293t
SV40 büyük T antijeninin mutant bir versiyonunun ekspresyonu nedeniyle, SV 40 replikasyon orijinli transfekte plazmitler, rekombinant protein miktarını büyük ölçüde artırabilir. Bu hücre dizisi, biyoteknoloji endüstrisinde protein ekspresyonu ve rekombinant retrovirüslerin üretimi için yaygın olarak kullanılmaktadır.
HEK293 ve HEK293t Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- HEK293 ve HEK293t, transfeksiyon eğilimleri nedeniyle hücre biyolojisi araştırmalarında yaygın olarak kullanılan iki hücre dizisidir.
- Her iki hücre dizisi de laboratuvardan türetilmiştir.
- Bu hücre dizileri, rekombinant protein üretiminin miktarını büyük ölçüde artırabilir.
- Bir plazmit vektörü ile embriyonik insan böbrek hücrelerinin transfekte edilmesi yoluyla yapılırlar.
HEK293 ve HEK293t Arasındaki Fark Nedir?
HEK293, kesilmiş insan adenovirüs tip 5DNA ile transfekte edilmiş embriyonik insan böbreğinden türetilen ölümsüzleştirilmiş bir hücre dizisidir. Buna karşılık, HEK293t, SV40 replikasyon orijini taşıyan bir plazmit vektörü ile transfekte edilmiş HEK293 orijinal hücre çizgisinden türetilen bir yavru hücre çizgisidir. HEK293 ve HEK293t arasındaki temel fark budur. Ayrıca HEK293, SV40 büyük T antijeninin mutant versiyonunu ifade etmez. Öte yandan, HEK293t, SV40 büyük T antijeninin mutant versiyonunu ifade eder.
Aşağıdaki infografik, HEK293 ve HEK293t arasındaki farkları yan yana karşılaştırma için tablo biçiminde listeler.
Özet – HEK293 vs HEK293t
HEK293 ve HEK293t, istikrarlı büyümeleri ve transfeksiyon eğilimleri nedeniyle hücre biyolojisi araştırmalarında yaygın olarak kullanılan iki hücre dizisidir. HEK293, kesilmiş insan adenovirüs tip 5DNA ile transfekte edilmiş bir embriyonik insan böbreğinden türetilen ölümsüzleştirilmiş bir hücre çizgisi iken HEK293t, SV40 replikasyon orijini taşıyan bir plazmit vektörü ile transfekte edilmiş HEK293 orijinal hücre çizgisinden türetilen bir yavru hücre çizgisidir. Böylece, bu HEK293 ve HEK293t arasındaki farkı özetler.
