Anahtar Farkı – RPMI ve DMEM
Araştırma çalışmalarının çoğu, hayvan hücresi kültürünü içerir ve bu nedenle bu çalışmalar, özel büyüme koşulları altında hayvan hücre hatlarının bakımını gerektirir. Hayvan hücresi kültürü, ilaç metabolizmasını belirlemek için farmakolojik çalışmalarda, hastalık teşhisinde ve kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Hücre kültürü ortamı, hayvan hücre kültürünün önemli bir yönüdür. Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı (DMEM) ve Roswell Park Memorial Enstitüsü Ortamı (RPMI), hayvan hücresi kültüründe kullanılan iki kültür ortamıdır. RPMI, memeli hücrelerini süspansiyon kültüründe kültürlemek için yaygın olarak kullanılan bir ortamdır. DMEM, amino asit ve vitamin konsantrasyonlarının dört katına kadar arttırıldığı, modifiye edilmiş bir bazal ortam türüdür. DMEM, yapışık kültürlerde hücrelerin kültürlenmesinde kullanılır. İki medya arasındaki temel fark, medyanın kültür türüdür. Süspansiyon kültürlerinde RPMI kullanılırken, yapışık hücreleri kültürlemek için DMEM kullanılır.
RPMI nedir?
RPMI veya Roswell Park Memorial Institute Medium, RPMI 1640 olarak da anılır. Medyanın adı, medyanın keşfedildiği enstitü tarafından türetilmiştir. Bu ortam, hayvan hücre kültüründe, özellikle memeli hücrelerinin büyümesi için yaygın olarak kullanılır. Başlangıçta insan lenfositlerini büyütmek için geliştirildiler.
Aşağıdaki bileşenler RPMI'ye dahildir.
- Glikoz
- pH göstergesi (fenol kırmızısı)\
- Tuzlar (sodyum klorür, sodyum bikarbonat, disodyum fosfat, potasyum klorür, magnezyum sülfat ve kalsiyum nitrat)
- Amino asitler
- Vitaminler (i-inositol, kolin klorür, para-aminobenzoik asit, folik asit, nikotinamid, piridoksin hidroklorür, tiamin hidroklorür, kalsiyum pantotenat, biotin ve riboflavin, siyanokobalamin)
RPMI'nin özelliği, ortamdaki artan fosfat konsantrasyonudur. RPMI %5 Karbondioksit atmosferinde kullanılır. Bu, hücre büyümesi için maksimum ve optimal koşulları sağlayacaktır. Ortamın pH'ı, bikarbonat tamponlama sistemi tarafından 8.0'da tutulur.
Şekil 01: Bir Petri kabında Hücre Kültürü
Hücre Kültüründe RPMI Uygulamaları
- İnsan T ve B lenfositlerinin, Kemik iliği hücrelerinin ve hibridomun yetiştirilmesi.
- İnsan neoplastik hücrelerini incelemek için kullanılır.
DMEM nedir?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM), ticari olarak hazırlanmış modifiye bir besiyeridir. Orta tozun orijinal dokusu sarıdır. DMEM'de vitamin konsantrasyonu dört katına kadar artırılarak ortamdaki besin içeriği artar.
DMEM ayrıca ferrik nitrat, sodyum piruvat gibi daha fazla tuz ve serin ve glisin gibi bazı esansiyel olmayan amino asitler eklenerek değiştirilir. Ortamdaki glikoz formülasyonu da değiştirilir. Orijinal formülasyon 1000 mg/L glukozdan oluşurken DMEM'de konsantrasyon 4500 mg/L'ye kadar artırılır. DMEM ayrıca tam bir ortam olmadığı için bir serum ortamının eklenmesini gerektirir. Çoğu zaman, DMEM, Fetal Bovine Serum (FBS) ile desteklenir. FBS, kültür süreci için gerekli proteinleri ve büyüme faktörlerini sağlar.
Ortamın pH'ı, Sodyum Bikarbonat ilavesiyle değişir. Sodyum Bikarbonat eklenmeden önce ortamın pH'ı 6,80 – 7,40 civarındayken, Sodyum Bikarbonat eklendikten sonraki pH 7,60 – 8,20 aralığındadır. Ortamın saklama sıcaklığı 2 – 8 0C.
Şekil 02: DMEM
DMEM Uygulamaları
- Fare embriyonik hücrelerinde polyomavirüsün plak oluşturma yeteneğini incelemek.
- Temas engelleme çalışmalarında.
- Araştırma ve analizde tavuk hücre kültürleri.
RPMI ve DMEM Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Hayvan hücre kültüründe hem RPMI hem de DMEM kullanılır.
- Hem RPMI hem de DMEM ortamı sıvı formülasyonlardır.
- Hem RPMI hem de DMEM ortamı, büyüme için gerekli olan temel amino asitleri, vitaminleri ve inorganik tuzları içerir.
- Hem RPMI hem de DMEM ortamı eksik. Bu nedenle serum eklenmelidir.
- Hem RPMI hem de DMEM ortamı, karbon kaynağı olarak glikoz kullanır.
- Hem RPMI hem de DMEM ortamı daha yüksek pH'a sahiptir.
RPMI ve DMEM Arasındaki Fark Nedir?
RPMI ve DMEM |
|
| RPMI, memeli hücrelerini bir süspansiyon kültüründe kültürlemek için yaygın olarak kullanılan bir ortamdır. | DMEM, arttırılmış amino asit ve vitamin konsantrasyonlarına sahip modifiye edilmiş bir bazal ortam türüdür. |
| Ekstra Fosfat Varlığı | |
| RPMI'da mevcut. | DMEM'de Yok. |
| Kullan | |
|
Yapışkan kültürlerdeki hücreleri kültürlemek için kullanılır.için kullanılır
|
| Kültür Türleri | |
| RPMI süspansiyon kültürleri için kullanılır. | DMEM, hücre yapıştırılmış kültürler için kullanılır. |
Özet – RPMI ve DMEM
Hem RPMI hem de DMEM, hayvan hücresi kültüründe özellikle lenfositler dahil olmak üzere in vitro olarak hayvan hücre hatlarının kültürlenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. DMEM, artan besin konsantrasyonunun olduğu değiştirilmiş bir bazal ortamdır. Roswell Park Memorial Institute tarafından geliştirilen RPMI, aynı zamanda özellikle memeli lenfositleri için hayvan hücresi kültüründe kullanılan bir besiyeridir. Her iki ortam da ticari olarak mevcuttur. RPMI ve DMEM arasındaki fark budur.
