Anahtar Farkı – DMEM ve EMEM
Hayvan hücre kültürü, birçok araştırma faaliyeti yürütmek için hayvan hücre dizilerini korumak için yapılır. Hayvan hücre dizileri steril koşullar altında korunur ve özel teknikler gerektirir. Aşı üretimi ile ilgili çalışmalarda, hücrenin kanserojen ve mutajenlere karşı davranışını belirlemek ve kanser araştırmalarında kullanılırlar. Hücre kültürü ortamı, hayvan hücre kültürünün başarısı için çok önemlidir. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ve Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) gibi farklı hücre kültürü ortamı türleri vardır. DMEM, amino asit ve vitamin konsantrasyonlarını dört katına kadar arttıran modifiye edilmiş bir bazal ortamdır. Bu aynı zamanda ortamın besin koşullarını artıran bazı ikameleri de içerir. EMEM, Harry Eagle tarafından geliştirilen ilk hayvan hücre kültürü ortamlarından biridir. Minimum miktarda besin bileşimi içeren basit, bazal bir ortamdır. İki ortam arasındaki temel fark, besin bileşimidir. EMEM, kültürün büyümesi için gereken minimum besin konsantrasyonlarından oluşurken DMEM, artan amino asit ve vitamin konsantrasyonlarına sahip çok karmaşık bir ortamdır.
DMEM nedir?
Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı (DMEM), ticari olarak kremsi beyaz bir toz olarak hazırlanan modifiye edilmiş bir ortam türüdür. Bu, EMEM'den uyarlanmıştır ve besin bileşimi, amino asitlerin ve vitaminlerin konsantrasyonu artırılarak değiştirilir. Amino asitlerin konsantrasyonu bazal ortama göre iki katına kadar artar. Vitamin konsantrasyonu dört katına kadar artırılır, böylece ortamdaki besin içeriği artar.
DMEM ayrıca ferrik nitrat, sodyum piruvat gibi daha fazla tuz ve serin ve glisin gibi bazı esansiyel olmayan amino asitler eklenerek değiştirilir. Ortamdaki glikoz konsantrasyonu da değişir. Orijinal formülasyon 1000 mg/L glukozdan oluşurken DMEM'de konsantrasyon 4500 mg/L'ye kadar artırılır. DMEM ayrıca tam bir ortam olmadığı için bir serum ortamının eklenmesini gerektirir. Çoğu zaman, DMEM, Fetal Bovine Serum (FBS) ile desteklenir. FBS, kültür süreci için gerekli proteinleri ve büyüme faktörlerini sağlar.
Ortamın pH'ı, Sodyum Bikarbonat ilavesiyle değişir. Sodyum Bikarbonat eklenmeden önce ortamın pH'ı 6.80 – 7.40 civarındayken, Sodyum Bikarbonat eklendikten sonra pH 7.60 – 8.20 aralığındadır. Medyanın saklama sıcaklığı 2 – 8 0C.
Şekil 01: DMEM
DMEM Uygulamaları
- Fare embriyonik hücrelerinde polyomavirüsün plak oluşturma yeteneğini incelemek.
- Temas engelleme çalışmalarında
- Tavuk hücre kültürlerinde
EMEM nedir?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), hayvan hücre dizilerinin hücre kültüründe geliştirilen ilk besiyerlerinden biridir. EMEM kullanılarak büyütülen ilk hayvan hücre dizisi türleri, Fare L hücrelerini ve HeLa hücrelerini içerir. EMEM ortamı da değiştirilmiş bir ortam türüdür. Harry Eagle ilk önce EMEM ortamını formüle etti. EMEM ortamı, hücre tiplerinin gerektirdiği minimum konsantrasyonda esansiyel amino asitleri ve vitaminleri içeriyordu. Esansiyel olmayan amino asitler formülasyona dahil edilmemiştir ve glikoz ve sodyum bikarbonat konsantrasyonları az altılmıştır. Her ne kadar ortam, hücrelerin başarılı büyümesi için dengeli miktarda minimum büyüme gereksinimleri içeriyordu.
EMEM tam bir ortam değildir. Bu nedenle, memeli hücrelerinin başarılı bir şekilde büyümesi için serum takviyesi gereklidir. EMEM çok çeşitli hücrelerde kullanılır ve hücre kültürü araştırmacıları arasında hala popüler bir ortamdır.
DMEM ve EMEM Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Hayvan hücre kültüründe her iki ortam türü de kullanılır.
- Her iki ortam türü de sıvı formülasyonlardır.
- Her iki medya türü de bazal medyadan değiştirilmiş medyadır.
- Her iki ortam türü de büyüme için gerekli olan temel amino asitleri, vitaminleri ve inorganik tuzları içerir.
- Her iki medya türü de eksik. Bu nedenle serum eklenmelidir.
- Her iki medya türü de karbon kaynağı olarak glikoz kullanır.
- Her iki ortam türü de daha yüksek pH'a sahiptir ve sodyum bikarbonat eklenerek ayarlanır.
DMEM ve EMEM Arasındaki Fark Nedir?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM, artan amino asit ve vitamin konsantrasyonları ile değiştirilmiş bir bazal ortam türüdür. Bu aynı zamanda ortamın besin koşullarını artıran bazı ikameleri de içerir. | EMEM, Harry Eagle tarafından geliştirilen ilk hayvan hücre kültürü ortamlarından biridir. Minimum miktarda besin bileşimi içeren basit, bazal bir ortamdır. |
| Amino Asit Değişiklikleri | |
| Amino asit konsantrasyonu DMEM ortamında iki katına kadar arttı. | EMEM'de minimum amino asit konsantrasyonu kullanılır. |
| Vitaminlerin Modifikasyonları | |
| Vitamin konsantrasyonu DMEM'de dört kata kadar arttı. | EMEM'de minimum vitamin konsantrasyonu kullanılır. |
| Glikoz Konsantrasyonu | |
| Glikoz konsantrasyonu DMEM'de 4500 mg/L'ye kadar yükseldi. | Glikoz konsantrasyonu EMEM'de 1000 mg/L'dir. |
| Esansiyel Olmayan Amino Asitlerin Varlığı | |
| DMEM'de mevcut. | EMEM'de Yok. |
| Ek Bileşenlerin Varlığı | |
| Diferik nitrat, sodyum piruvat gibi bileşenler DMEM'de bulunur. | EMEM minimum miktarda besin içerir. |
Özet – DMEM ve EMEM
DMEM ve EMEM, temel olarak besin bileşimlerinde farklılık gösteren iki popüler hayvan hücre kültürü ortamıdır. DMEM, bazı yeni bileşenlerin eklenmesiyle birlikte besin konsantrasyonlarının arttırıldığı EMEM'in değiştirilmiş şeklidir. EMEM minimal bir ortamdır ve hayvan hücre dizilerinin başarılı bir şekilde büyümesi için gerekli tüm temel faktörleri içerir. Bu besiyerleri yüksek steril koşullarda kullanılmalı ve kullanımdan önce her iki besiyerine de serum eklenmelidir. DMEM ve EMEM arasındaki fark budur.
DMEM ve EMEM karşılaştırmasının PDF'sini indirin
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlarla kullanabilirsiniz. Lütfen PDF sürümünü buradan indirin DMEM ve EMEM Arasındaki Fark
