İyon değiştirme ve boyut dışlama kromatografisi arasındaki temel fark, iyon değişim kromatografisinin iyonik maddeleri yüke göre analiz etmek için kullanılması, boyut dışlama kromatografisinin ise boyuta göre büyük molekülleri analiz etmek için kullanılmasıdır.
Kromatografi, farklı karışımları analiz etmek için kullanılabilecek analitik bir tekniktir. Kromatografik teknikler, maddeleri analiz etmek için kullanılan parametreye göre adlandırılır – örn. boyut dışlama kromatografisi, iyon değişim kromatografisi, vb.
İyon Değişim Kromatografisi nedir?
İyon değişim kromatografisi, iyonik maddeleri analiz edebildiğimiz analitik bir tekniktir. İnorganik anyonları ve katyonları (yani klorür ve nitrat anyonları ve potasyum, sodyum katyonları) analiz etmek genellikle yararlıdır. Çok yaygın bir yöntem olmasa da organik iyonları kullanarak analiz edebiliyoruz. Ayrıca bu tekniği proteinlerin saflaştırılması için kullanabiliriz çünkü proteinler belirli pH değerlerinde yüklü moleküllerdir. Burada yüklü parçacıkların bağlanabileceği katı bir sabit faz kullanıyoruz. Örneğin, katı destek olarak reçine polistiren-divinilbenzen kopolimerlerini kullanabiliriz.
Şekil 01: İyon Değişim Kromatografisinin Arkasındaki Teori
Bunu daha fazla açıklamak için, durağan faz, sülfat anyonları veya kuaterner amin katyonları gibi sabit iyonlara sahiptir. Bu sistemin tarafsızlığını korumak istiyorsak, bunların her biri bir karşı iyonla (zıt yüklü bir iyon) ilişkilendirilmelidir. Karşı iyon bir katyon ise, sistemi katyon değişim reçinesi olarak adlandırırız. Ancak karşı iyon bir anyon ise, sistem bir anyon değiştirici reçinedir. Ayrıca iyon değişim kromatografisinde beş ana adım vardır:
- İlk aşama
- Hedefin adsorpsiyonu
- Elüsyonun başlangıcı
- Elüsyonun sonu
- Yenilenme
Boyut Dışlama Kromatografisi nedir?
Boyut dışlama kromatografisi veya SEC, bir karışımdaki moleküllerin boyutlarına ve molekül ağırlıklarına göre ayrılabildiği analitik bir tekniktir. Genellikle makromolekül adı verilen büyük moleküllerle çalışır. Tipik olarak, analiz için sulu bir çözelti kullanılır. Daha sonra jel filtrasyon kromatografisi denir. Organik bir çözücü olduğunda buna jel geçirgenlik kromatografisi denir.
Jel filtrasyon kromatografisi, mobil faz olarak sulu bir çözelti kullandığımız bir boyut dışlama kromatografisi biçimidir. Bu nedenle, bu teknikte sıklıkla kullandığımız mobil faz, sulu bir tampondur. Ayrıca bu ayırma için kromatografik bir kolon kullanıyoruz ve kolonu gözenekli boncuklarla doldurmamız gerekiyor. Genellikle gözenekli malzeme olarak Sephadex ve agaroz yararlıdır. Dolayısıyla, bu malzemeler deneyimizin durağan aşamasıdır. Ayrıca, ayırdığımız makromoleküllerin boyutunu belirlemek için bu boncukların gözenek boyutunu kullanabiliriz. Ancak, bu sadece bir tahmindir.
Şekil 02: Boyut Dışlama Kromatografisi için Bir Cihaz
Jel geçirgenlik kromatografisi, mobil faz olarak organik bir çözücü kullandığımız bir boyut dışlama kromatografisi biçimidir. Bu nedenle hekzan ve toluen gibi solüsyonları bu amaçla kullanabiliriz. Sabit faz, jel filtrasyon kromatografisindeki ile aynı, gözenekli bir malzemedir. Bu teknik genellikle polimerlere ve diğer organik çözünür malzemelere uygulanır. Tekniğin etki yöntemi, jel filtrasyon kromatografisininkine benzer.
İyon Değişimi ve Boyut Dışlama Kromatografisi Arasındaki Fark Nedir?
Kromatografi, farklı karışımları analiz etmek için kullanılabilecek analitik bir tekniktir. İyon değiştirme ve boyut dışlama kromatografisi arasındaki temel fark, iyon değişim kromatografisinin iyonik maddeleri yüke göre analiz etmek için kullanılması, boyut dışlama kromatografisinin ise boyuta göre büyük molekülleri analiz etmek için kullanılmasıdır.
Aşağıdaki bilgi grafiği, iyon değişimi ve boyut dışlama kromatografisi arasındaki fark hakkında daha fazla bilgi verir.
Özet – İyon Değişimi ve Boyut Dışlama Kromatografisi
Kromatografi, farklı karışımları analiz etmek için kullanılabilecek analitik bir tekniktir. İyon değiştirme ve boyut dışlama kromatografisi arasındaki temel fark, iyon değişim kromatografisinin iyonik maddeleri yüke göre analiz etmek için kullanılması, boyut dışlama kromatografisinin ise boyuta göre büyük molekülleri analiz etmek için kullanılmasıdır.
