Elektroporasyon ve mikroenjeksiyon arasındaki temel fark, elektroporasyonun DNA'yı konakçı hücrelere iletmek için yüksek voltajlı bir elektrik darbesi kullanan bir teknik olması, mikroenjeksiyon ise DNA'yı hücreye iletmek için ince uçlu bir cam iğne veya mikropipet kullanan bir tekniktir. konak hücreler.
Dönüşüm, yabancı DNA'nın konak hücrelere aktarıldığı süreçtir. Dönüşüm yoluyla, organizmanın genetik yapısı değiştirilebilir. Farklı kimyasal, biyolojik ve fiziksel dönüşüm yöntemleri vardır. Bazıları doğrudan yöntemler, bazıları ise dolaylı yöntemlerdir. Elektroporasyon ve mikroenjeksiyon, doğrudan dönüşüm yöntemleri olan iki fiziksel yöntemdir. Elektroporasyon, DNA'yı konakçı hücrelere dahil etmek için biyolojik hücre zarlarında mikroskobik gözenekleri indüklemek için bir elektrik alanı kullanır. Mikroenjeksiyon ise bir mikropipet veya ince uçlu cam iğne kullanarak DNA'yı doğrudan iletir.
Elektroporasyon nedir?
Elektroporasyon, DNA'yı bitki hücrelerine ve protoplastlara ileten bir dönüşüm tekniğidir. Bu teknik, yüksek voltajlı bir elektrik darbesi kullanır. Bitki materyalleri, DNA'ya sahip bir tampon solüsyonunda inkübe edilir. Daha sonra çözelti, yüksek voltajlı bir elektrik darbesine tabi tutulur. Bitki hücre zarlarında yüksek voltajla indüklenen gözenekler oluşturulur ve bu gözenekler aracılığıyla DNA hücrelerin içine göç eder ve bitki genomik DNA'sı ile bütünleşir. Bu yöntemin verimliliği, bitki materyallerine ve arıtma koşullarına bağlıdır.
Şekil 01: Elektroporasyon
Dönüşüm elektroporasyon kullanılarak yapıldığında, hücrelerin sadece %40 ila %50'si DNA alır. Ayrıca, transforme edilen hücrelerin sadece %50'si bu yöntem altında hayatta kalabilir. Ancak bu yöntemin uygulanması kolaydır ve hücrelerin biyolojik yapısını veya işlevini değiştirmez. Ayrıca, çok çeşitli hücreler için kullanılabilir.
Mikroenjeksiyon nedir?
Mikroenjeksiyon, DNA'yı büyük hücrelere sokarken özellikle yararlı olan bir dönüşüm tekniğidir. Bu yöntem, DNA'yı bitki protoplastlarına veya hayvan hücrelerine (oositler, yumurtalar ve embriyolar) iletmek için ince uçlu bir cam iğne veya bir mikropipet kullanır. Aslında bu yöntem, fareler gibi transgenik hayvanlar yapmak için daha uygundur. Bu yöntemde DNA, doğrudan çekirdeğe veya sitoplazmaya dahil edilir.
Elektroporasyona benzer şekilde, mikroenjeksiyon doğrudan bir dönüşüm tekniğidir. Mikroenjeksiyon, özel bir mikroskop kurulumu altında gerçekleştirilir. Pipet tutma, iğne, mikroskop aşaması ve video teknolojisinin bilgisayarlı kontrolü bu tekniğin etkinliğini artırmıştır. DNA enjekte edilirken, dönüştürülmüş hücreleri kolayca tanımlamak için bir boya kullanılabilir. Bu nedenle, dönüştürülmüş hücreleri tanımlamak için ayrı bir yöntem kullanmaya gerek yoktur. En önemlisi, mikroenjeksiyon prosedürü bir işaretleyici gen gerektirmez.
Şekil 02: Mikroenjeksiyon
Ayrıca, bu yöntem çok etkili ve tekrarlanabilir. Bununla birlikte, bu yöntem maliyetli, zaman alıcı ve vasıflı personel gerektirir. Ayrıca, bu yöntemle yalnızca az sayıda hücre tedavi edilebilir.
Elektroporasyon ve Mikroenjeksiyon Arasındaki Benzerlikler Nelerdir?
- Hem elektroporasyon hem de mikroenjeksiyon iki tür dönüşüm tekniğidir.
- Bu yöntemler DNA'yı bitki hücrelerine ve protoplastlara iletir.
- Doğrudan yöntemlerdir.
- Üstelik bunlar fiziksel veya mekanik yöntemlerdir.
- Her iki yöntem de transgenik bitkiler ve hayvanlar üretirken faydalıdır.
Elektroporasyon ve Mikroenjeksiyon Arasındaki Fark Nedir?
Elektroporasyon tekniği, DNA'yı tanıtmak için bir elektrik alanı kullanırken, mikroenjeksiyon tekniği, DNA'yı tanıtmak için bir mikropipet veya ince uçlu bir cam iğnedir. Bu nedenle, elektroporasyon ve mikroenjeksiyon arasındaki temel fark budur. Ayrıca, elektroporasyon çoğunlukla bitki hücreleri ve protoplastlar için kullanılırken, mikroenjeksiyon çoğunlukla hayvan hücreleri için kullanılır. Ayrıca, elektroporasyon mikroenjeksiyon kadar zaman alıcı değildir.
Aşağıdaki infografik, elektroporasyon ve mikroenjeksiyon arasındaki farkları tablo şeklinde özetler.
Özet – Elektroporasyon ve Mikroenjeksiyon
Elektroporasyon ve mikroenjeksiyon, gen transferinin iki fiziksel yöntemidir. Elektroporasyon, yüksek voltajlı bir elektrik alanı kullanırken mikroenjeksiyon bir cam iğne veya mikropipet kullanır. Bu nedenle, elektroporasyon ve mikroenjeksiyon arasındaki temel fark budur. Ancak, her iki yöntem de doğrudan eksojen DNA'yı konakçı hücrelere sokar.
